背景及概述[1]
谷丙轉(zhuǎn)氨酶全稱“谷氨酸丙酮酸轉(zhuǎn)氨酶”。其作用為催化谷氨酸與丙酮酸之間可逆轉(zhuǎn)移氨基而形成α-酮戊二酸與丙氨酸，以磷酸吡哆醛為輔酶，維持細(xì)胞中氨基酸代謝。谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)在肝臟、心肌等組織細(xì)胞損傷時釋放入血中，臨床上通過測定血中GPT的活力來了解有關(guān)臟器病變的性質(zhì)和程度。由于肝臟中所含的GPT約為心臟、肌肉、腎組織的三倍多，所以血清中GPT明顯升高幾乎總是由肝病引起的。
一般在毒物或藥物引起的中毒性肝損害時GPT呈顯著增高；各型病毒性肝炎活動期GPT明顯增高；其他肝臟疾病、膽道疾患、胰腺炎、心肌病變等均可有GPT的升高。另外某些生理?xiàng)l件的變化亦可引起GPT升高，如劇烈體育活動或妊娠期可有輕度GPT一過性升高。谷丙轉(zhuǎn)氨酶的測定，目前臨床實(shí)驗(yàn)室常采用光電比色(賴氏)法，正常參考值為40單位以下。
相關(guān)研究[2-4]
1）血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)與代謝綜合征(MS)及其組分之間的關(guān)系。采樣分層整群抽樣方法對在江蘇省常州市武進(jìn)區(qū)抽取的8818名居民進(jìn)行問卷調(diào)查、體格檢查和實(shí)驗(yàn)室檢測。結(jié)論是血清ALT水平與MS及其組分相關(guān)，血清ALT水平可能成為MS患病的一個預(yù)測指標(biāo)。
2）急性有機(jī)磷中毒病人病情嚴(yán)重程度與谷丙轉(zhuǎn)氨酶的相關(guān)性。檢測42例急性有機(jī)磷中毒病人的谷丙轉(zhuǎn)氨酶，分析其檢測值與病情相關(guān)性。結(jié)果：急性有機(jī)磷中毒患者中，伴有谷丙轉(zhuǎn)氨酶升高，而且升高程度與病情嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，嚴(yán)重病例谷丙轉(zhuǎn)氨酶檢測值明顯高于一般患者，谷丙轉(zhuǎn)氨酶差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P<0.05。結(jié)論：急性有機(jī)磷中毒病人谷丙轉(zhuǎn)氨酶升高值是判斷病情嚴(yán)重的指標(biāo)之一。
3）血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)水平與肝臟病理改變的關(guān)系。對651例病理確診的各型肝炎患者，按肝穿時ALT水平高低，用SPSS80軟件分析。結(jié)果 各型肝炎血清ALT水平依次為急性肝炎(AH)>慢性肝炎(CH)中>CH重>CH輕>活動性肝硬變(ALC)>靜止性肝硬變(SLC)；ALT正常組86例中，105%肝組織正常；僅中度ALT異常的CH組血清ALT與肝病理損害程度弱相關(guān)(r=0189，P=0006)。結(jié)論是血清ALT水平與肝臟病理改變程度無明確相關(guān)性。
測定方法[5]
基于銅納米簇?zé)晒馓结樁繖z測溶液中谷丙轉(zhuǎn)氨酶的方法，它以谷胱甘肽為保護(hù)劑的銅納米簇作為熒光探針，通過熒光“off-on”模式特異性檢測溶液中谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量，其特征在于按如下的步驟進(jìn)行：
(1)硫普羅寧母液配置：稱取0.1000g硫普羅寧溶于5mL高純水中；將母液稀釋之濃度為1mg/mL的低濃度，低溫保存待用；
(2)分別配置濃度為1，5，50，100，500，1000U/L的谷丙轉(zhuǎn)氨酶溶液，低溫保存待用；
(3)將制備好的基于谷胱甘肽為穩(wěn)定劑的銅納米簇均勻分散到高純水中，配制成濃度為0.675mM，體積為4mL的檢測體系，并利用熒光分光光度計(jì)測定此時的熒光強(qiáng)度，在激發(fā)波長354nm的激發(fā)下，該熒光探針在632nm處表現(xiàn)出較強(qiáng)發(fā)射；
(4)將1.2mL銅納米簇均勻分散到2.6mL高純水中，混合均勻后，向混合溶液中加入0.1mL1mg/mL的硫普羅寧溶液，加高純水0.1mL，待硫普羅寧與銅納米簇溶液充分作用后測試體系的熒光強(qiáng)度，此時的熒光強(qiáng)度發(fā)生明顯猝滅，故硫普羅寧可作為該檢測體系的猝滅劑；
(5)向離心管中加入2.6mL高純水中，1.2mL銅納米簇溶液，混合均勻后，向混合溶液中加入0.1mL1mg/mL的硫普羅寧溶液，充分反應(yīng)后再加入0.1mL谷丙轉(zhuǎn)氨酶溶液，硫普羅寧與谷丙轉(zhuǎn)氨酶充分作用，使得熒光強(qiáng)度恢復(fù)并檢測其熒光發(fā)射光譜，通過與（4）中熒光強(qiáng)度對比，可以利用熒光發(fā)射光譜強(qiáng)度的恢復(fù)值證明該銅納米簇作為熒光探針檢測谷丙轉(zhuǎn)氨酶的可行性；
(6)檢測溶液中谷丙轉(zhuǎn)氨酶的含量線性的測定
向離心管中分別加入0.2~3.4mL高純水，0.4~3.6mL銅納米簇溶液，0.1mL硫普羅寧溶液，向混合溶液中分別加入0.1mL不同濃度1~1000U/L的谷丙轉(zhuǎn)氨酶溶液，充分反應(yīng)1~15min，分別用熒光分光光度計(jì)檢測加入谷丙轉(zhuǎn)氨酶前后的熒光強(qiáng)度；所述的銅納米簇是指基于谷胱甘肽為穩(wěn)定劑的銅納米簇。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在谷丙轉(zhuǎn)氨酶濃度在1-1000U/L范圍內(nèi)，銅納米簇的熒光強(qiáng)度恢復(fù)值與谷丙轉(zhuǎn)氨酶的濃度呈現(xiàn)線性關(guān)系，線性方程為DF=116.90744+0.54101X（DF是加入谷丙轉(zhuǎn)氨酶后的熒光強(qiáng)度與只加入硫普羅寧后銅納米簇的熒光強(qiáng)度得差值，X是谷丙轉(zhuǎn)氨酶的濃度），線性相關(guān)系數(shù)為0.992，檢出限為0.61U/L。
主要參考資料
[1] 衛(wèi)生學(xué)大辭典
[2] 血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶與代謝綜合征相關(guān)性
[3] 谷丙轉(zhuǎn)氨酶檢測對有機(jī)磷中毒患者病情判斷的意義
[4] 血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶水平與肝臟病理改變程度相關(guān)性探討
[5] CN201811035294.6基于銅納米簇?zé)晒馓结樁繖z測溶液中谷丙轉(zhuǎn)氨酶的方法