概述^[1]

胎牛血清是妊娠后期剖腹取出的胎牛血清。胎牛血清營養(yǎng)成分完全而豐富，代謝產(chǎn)物極少，微生物感染的可能性最小，品質(zhì)最高，是組織細(xì)胞培養(yǎng)和病毒增殖時(shí)的重要營養(yǎng)來源。在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，經(jīng)常加入5%-20%的胎牛血清(澳洲)，最常使用的胎牛血清(澳洲)濃度是10%。高濃度的血清可能改變細(xì)胞的基因表達(dá)譜，影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，在實(shí)驗(yàn)中使用10%的澳洲澳洲胎牛血清培養(yǎng)293T細(xì)胞，效果非常好。但是有些細(xì)胞也會(huì)使用5%的胎牛血清(澳洲)或者20%的胎牛血清(澳洲)，要根據(jù)具體細(xì)胞選擇合適的胎牛血清(澳洲)濃度。

保存方法^[2]

1、需要長期保存的澳洲牛血清，例如澳洲南美胎牛血清，必須儲(chǔ)存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過1個(gè)月。切勿將血清在37℃放置太久，否則血清會(huì)變得渾濁，同時(shí)血清中的有效成分會(huì)被破壞，而影響血清質(zhì)量。如果一次無法用完一瓶，可將40～45ml分裝于無菌50ml離心管中。由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%，因此，血清在凍入低溫冰箱前，必須預(yù)留一定體積空間，否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。

2、一般廠商提供的血清為無菌，無需再過濾除菌。如發(fā)現(xiàn)澳洲牛血清有懸浮物，例如澳洲北美胎牛血清中發(fā)現(xiàn)有懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾，切勿直接過濾血清。

3、瓶裝胎牛血清(澳洲)南美解凍需采用逐步解凍法：-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫，待全部溶解后再分裝，一般以50ml無菌離心管可分裝40～45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。.切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍，這樣因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀。

4、熱滅活是指56℃，30分鐘加熱已完全解凍的血清.加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分滅活.除非必須，一般不建議作此熱處理，因?yàn)闊崽幚頃?huì)造成血清沉淀物顯著增多，而且還會(huì)影響血清的質(zhì)量.補(bǔ)體參與反應(yīng)有：細(xì)胞毒作用，平滑肌細(xì)胞收縮，肥大細(xì)胞和血小板釋放組，增強(qiáng)吞噬作用，促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化。

5、血清中的沉淀物和絮狀物：主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成，這些絮狀物不會(huì)影響血清本身的質(zhì)量.可用離心3000rpm，5分鐘去除，也可不用處理。顯微鏡下"小黑點(diǎn)"：經(jīng)過熱處理過的血清，沉淀物的形成會(huì)顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點(diǎn)"，常誤認(rèn)為血清受污染。一般情況下，此小黑點(diǎn)不會(huì)影響細(xì)胞生長，但如果懷疑血清質(zhì)量，則應(yīng)立即停止使用，更換另一批號(hào)的血清。

主要參考資料

[1]農(nóng)業(yè)大詞典

[2]南美胎牛血清使用說明