背景及概述^[1]

洛普替尼（Ropotrectinib，TPX-0005）是美國(guó)TPTherapeutics公司研發(fā)的新一代ALK/ROS1/TRK小分子抑制劑。其與ROS1酪氨酸的結(jié)合能力是克唑替尼的90倍多。

洛普替尼作為新一代的ROS1/TRKA-C/ALK抑制劑獲得初步臨床效果：（1）對(duì)于未曾接受過(guò)TKI治療的患者，其客觀緩解率為70%；（2）對(duì)于TKI耐藥的患者，客觀緩解率為11%，其中有一例具有 ROS1 G2032R溶劑前沿突變的患者出現(xiàn)了持久性反應(yīng)；（3）對(duì)于NTRK融合陽(yáng)性實(shí)體瘤，包括1例NTRK融合陽(yáng)性類(lèi)似發(fā)生于乳腺的分泌性腫瘤，洛普替尼均初步表現(xiàn)出了腫瘤抑制力；（4）對(duì)于曾接受過(guò)重度治療的ALK融合陽(yáng)性非小細(xì)胞肺癌患者，該藥的活性目前是有限的；（5）洛普替尼耐受性良好，接受治療的患者出現(xiàn)的不良事件大多為1-2級(jí)，在可接受范圍內(nèi)。

制備^[1]

步驟1：(R)-5-((1-(5-氟-2-羥基苯基)乙基)氨基)吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(3)的制備

向(R)-2-(1-氨基乙基)-4-氟苯酚(2)(85g，443.56mmol，1.00eq.)和5-氯吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(1a)(100.08g，443.56mmol，1.00eq.)在n-BuOH(2L)中的溶液添加DIEA(343.96g，2.66mol，6.00eq.)。將混合物在120℃攪拌2hr。TLC(PE：EtOAc＝1：1)顯示反應(yīng)完成。反應(yīng)混合物在16℃下用H2O(500mL)稀釋?zhuān)⒂肊tOAc(500mL×3)萃取。合并的有機(jī)層用鹽水(500mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過(guò)濾并減壓濃縮產(chǎn)生殘?jiān)?。殘?jiān)ㄟ^(guò)柱色譜(SiO₂，石油醚/乙酸乙酯＝10/1到1：3)純化，產(chǎn)生為白色固體的(R)-5-((1-(5-氟-2-羥基苯基)乙基)氨基)吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(3)(122g，349.34mmol，78.76％收率，ee>99％純度)。¹HNMR(CDCl₃，400MHz)δ9.28(br.s.，1H)，8.26(s，1H)，8.14(d，J＝7.5Hz，1H)，6.95-6.89(m，2H)，6.87-6.80(m，1H)，6.18(d，J＝7.5Hz，1H)，5.98(d，J＝8.3Hz，1H)，5.71-5.54(m，1H)，4.50-4.35(m，2H)，1.60(d，J＝6.8Hz，3H)，1.42(t，J＝7.2Hz，3H)。

步驟2：5-(((R)-1-(2-(((S)-1-((叔丁氧羰基)氨基)丙-2-基)氧基)-5-氟苯基)乙基)氨基)吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(4)的制備

將(R)-5-((1-(5-氟-2-羥基苯基)乙基)氨基)吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(10.00g，29.04mmol)和(R)-(2-羥基丙基)氨基甲酸叔丁酯(聯(lián)合布洛克斯(Combi-Blocks)，7.63g，43.56mmol)的混合物從DCM/甲苯共沸干燥，然后再溶于DCM(11.62mL)中。向所述溶液添加PPh₃(11.43g，43.56mmol)，并攪拌混合物直至起始材料完全溶解。伴隨混合用5min向所述溶液添加DEAD(8.81g，43.56mmol)。將所述反應(yīng)攪拌3小時(shí)。用DCM(125mL)稀釋反應(yīng)混合物，然后添加NaOH水溶液(2M，100mL)。劇烈攪拌混合物12小時(shí)并分離層。水層用DCM(3×50mL)進(jìn)一步萃取。合并的萃取物用鹽水(50mL)洗滌，用Na₂SO₄干燥，并減壓濃縮。殘?jiān)每焖偕V(特利丹(Teledyne)ISCO系統(tǒng)，二氧化硅(330g)，0-40％乙酸乙酯的己烷溶液)純化，提供5-(((R)-1-(2-(((S)-1-((叔丁氧羰基)氨基)丙-2-基)氧基)-5-氟苯基)乙基)氨基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(4)(8.88g，60.9％收率)。LC-MSm/z502.2(M+H)⁺。¹HNMR(400MHz，氯仿-d)δ8.24(s，1H)，8.21(d，J＝7.6Hz，1H)，7.04(d，J＝8.4Hz，1H)，6.87(d，J＝6.0Hz，2H)，6.13(d，J＝7.2Hz，1H)，5.91(br.s.，1H)，4.58(d，J＝3.6Hz，1H)，4.43-4.28(m，2H)，3.52-3.34(m，2H)，1.54(d，J＝6.8Hz，3H)，1.47-1.36(m，12H)，1.30(d，J＝6.4Hz，3H)。

步驟3：5-(((R)-1-(2-(((S)-1-((叔丁氧羰基)氨基)丙-2-基)氧基)-5-氟苯基)乙基)氨基)吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-羧酸(5)的制備

向5-(((R)-1-(2-(((S)-1-((叔丁氧羰基)氨基)丙-2-基)氧基)-5-氟苯基)乙基)氨基)吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(6.98g，13.92mmol，1eq.)在甲醇(65mL)和THF(20mL)中的溶液添加LiOH(2M，47.9mL，95.8mmol)。將混合物在70℃加熱3hr，冷卻至環(huán)境溫度，然后用HCl水溶液(2M，95.8mL)淬滅以調(diào)節(jié)pH<5。用CH₂Cl₂(3×50mL)萃取反應(yīng)混合物，并經(jīng)Na₂SO₄干燥。過(guò)濾、蒸發(fā)和高真空干燥后，得到5-(((R)-1-(2-(((S)-1-((叔丁氧羰基)氨基)丙-2-基)氧基)-5-氟苯基)乙基)氨基)吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-羧酸(5)的白色固體，其不經(jīng)進(jìn)一步純化即用于下一步。LC-MSm/z474.2(M+H)⁺。

步驟4：5-(((R)-1-(2-(((S)-1-氨基丙-2-基)氧基)-5-氟苯基)乙基)氨基)吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-羧酸(6)的制備

向5-(((R)-1-(2-(((S)-1-((叔丁氧羰基)氨基)丙-2-基)氧基)-5-氟苯基)乙基)氨基)吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-羧酸(6.59g，13.92mmol)在CH2Cl2(130mL)中的溶液添加HCl的二惡烷溶液(4M，30.4mL)。在室溫下保持?jǐn)嚢?小時(shí)，直到通過(guò)LC-MS顯示反應(yīng)完成。將反應(yīng)混合物濃縮，并高真空干燥而提供為白色固體的化合物6，其不經(jīng)進(jìn)一步純化即用于下一步。LC-MSm/z374.2(M+H)⁺。

步驟5：(7S，13R)-11-氟-7，13-二甲基-6，7，13，14-四氫-1，15-乙烯橋吡唑并[4，3-f][1，4，8，10]苯并氧雜三氮雜環(huán)十三烯-4(5H)-酮(化合物1，洛普替尼)的制備

將5-(((R)-1-(2-(((S)-1-氨基丙-2-基)氧基)-5-氟苯基)乙基)氨基)吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-羧酸(5.20g，13.93mmol)溶于DMF(75mL)以制成溶液A。向Hunig堿(DIPEA)(14.40g，111.4mmol)在DMF(150mL)和DCM(350mL)中的溶液依次添加溶液A(25mL)和FDPP總量(5.62g，14.63mmol)的三分之一。將反應(yīng)攪拌1小時(shí)，并且LC-MS顯示偶聯(lián)反應(yīng)完成。同樣的過(guò)程再重復(fù)2次。將最終溶液在環(huán)境溫度下攪拌63小時(shí)(或直到通過(guò)LC-MS顯示反應(yīng)完成)。通過(guò)添加Na₂CO₃水溶液(2M，150mL)淬滅反應(yīng)，并將所述混合物攪拌15min，并用DCM(3×150mL)萃取。合并的有機(jī)層用Na₂SO₄干燥，減壓濃縮，并在快速色譜(特利丹ISCO系統(tǒng)，二氧化硅(220g)，0-7.5％甲醇的二氯甲烷溶液)上純化，提供為白色固體的(7S，13R)-11-氟-7，13-二甲基-6，7，13，14-四氫-1，15-乙烯橋吡唑并[4，3-f][1，4，8，10]苯并氧雜三氮雜環(huán)十三烯-4(5H)-酮(4.38g，12.33mmol，88.5％收率)。LC-MS：m/z[M+H]⁺356.2。¹HNMR(500MHz，DMSO-d6)δppm9.82(dd，J＝8.02，2.29Hz，1H)，8.81(d，J＝6.87Hz，1H)，8.58(d，J＝7.45Hz，1H)，8.04(s，1H)，7.12(dd，J＝9.45，3.15Hz，1H)，6.99-7.05(m，1H)，6.94-6.99(m，1H)，6.36(d，J＝7.45Hz，1H)，5.53(m，1H)，4.45-4.52(m，1H)，3.90(ddd，J＝13.46，8.31，4.01Hz，1H)，3.10-3.17(m，1H)，1.46(d，J＝6.30Hz，3H)，1.44(d，J＝7.45Hz，3H)。

主要參考資料

[1]CN201680052319.6手性二芳基大環(huán)及其用途