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卵磷脂的純化和純度鑒定

2021/2/23 9:56:22

背景及概述[1]

卵磷脂是磷脂的主要組成成分。磷脂(Phospholipid),也稱(chēng)磷脂類(lèi)、磷脂質(zhì),是一類(lèi)含磷酸根脂質(zhì)的總稱(chēng),屬于復(fù) 合脂質(zhì)。磷脂在植物種子、動(dòng)物臟器、血液、卵巢、蛋黃及細(xì)菌中與油脂并存,是生物細(xì)胞構(gòu) 成的必需物質(zhì),也是生命的基礎(chǔ)物質(zhì)之一。

一般磷脂組成成分包括:卵磷脂、腦磷脂、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰甘油和磷脂酰肌 醇。其中,卵磷脂是磷脂的主要組成成分,同時(shí)具有親水性磷酸脂酪基、膽堿或膽胺等(極性 基團(tuán))和疏水性脂肪酸基(非極性基團(tuán)),因此卵磷脂是一種兩性表面活性劑。具有分散、潤(rùn) 濕、溶解、消泡等作用,在營(yíng)養(yǎng)和保健方面也起著非常重要的作用,能預(yù)防和治療高膽固醇 和高脂血癥,緩解糖尿病的病情等功能,因此,卵磷脂是目前公認(rèn)的最具有生物學(xué)活性的磷 脂,在食品、醫(yī)藥、化妝品和飼料及其它工業(yè)部門(mén)都有著廣泛的應(yīng)用。

純度鑒定[1]

(1)稱(chēng)取500mg卵磷脂樣品,用氯仿溶解并定容至100mL,配制成5mg/mL的溶液;

(2)將上述卵磷脂溶液點(diǎn)樣于距一矩形薄層層析板底端1.0cm處,使點(diǎn)樣下方的薄層層析與展開(kāi)劑液面接觸,當(dāng)展開(kāi)劑上緣距離薄層層析板頂端1.3cm時(shí)立即取出薄層層析板,待薄層層析板上展開(kāi)劑涼干后,再將薄層層析板完全浸泡于顯色劑中,然后取出;

(3)可觀察至薄層層析板上的卵磷脂、脂肪酸與甘油酯、溶血卵磷脂的顯色斑點(diǎn)分別是黃色、白色、乳黃色,將薄層層析板掃描后測(cè)量出其面積分別為36mm2、4mm2和4mm2

(4)計(jì)算:卵磷脂的純度。

純化方法[2]

一種硅膠柱層析法分離純化卵磷脂的方法,

(1)取30g勻漿后的魚(yú)卵,丙酮與魚(yú)卵以1:5的料液比浸提35min,抽濾后濾餅用90% 的乙醇,在料液比1:5,提取溫度30℃的條件下,超聲輔助萃取15min,超聲波功率為300w,脈 沖間隔2s,提取1次,抽濾;

(2)濃縮干燥:將乙醇提取液經(jīng)40℃下減壓濃縮后,置于45℃真空干燥得到粗磷脂 2.1g;

(3)分別將2.1g粗磷脂溶于異丙醇,氯仿和95%乙醇中,以2mL/min流速倒入硅膠柱 中,分別采用三種洗脫體系,包括異丙醇-甲醇溶液(1:1),氯仿-甲醇(1:1)和95%乙醇。用 TLC板檢測(cè)樣品的洗脫順序。通過(guò)TLC分析,把與標(biāo)準(zhǔn)品卵磷脂有相同R值的PC餾分收集在一 起,減壓濃縮至膏狀,真空干燥得到的卵磷脂的純度分別為:92%,93.12%,87.22%;說(shuō)明氯 仿-甲醇體系洗脫效果,但是鑒于氯仿毒性較大,不宜用于卵磷脂的純化。綜合,選擇異丙醇-甲醇洗脫體系為洗脫條件。

參考文獻(xiàn)

[1] [中國(guó)發(fā)明,中國(guó)發(fā)明授權(quán)] CN201110003383.4 一種鑒別卵磷脂純度的方法

[2] [中國(guó)發(fā)明,中國(guó)發(fā)明授權(quán)] CN201410501211.3 一種硅膠柱層析法分離純化魚(yú)卵中卵磷脂的方法

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