背景及概述[1]
7-溴-1H-吡咯并[2,3-B][1,4]惡嗪-2(3H)-酮是一種有機(jī)中間體，可由5-溴-2-氯-3-硝基吡啶為原料先制備2-((5-溴-3-硝基吡啶-2-基)氧基)乙酸甲酯，然后關(guān)環(huán)得到7-溴-1H-吡咯并[2,3-B][1,4]惡嗪-2(3H)-酮。
制備[1]
步驟1：2-((5-溴-3-硝基吡啶-2-基)氧基)乙酸甲酯
將5-溴-2-氯-3-硝基吡啶(5g，21mmol，1.0當(dāng)量)和2-羥基乙酸甲酯(3.78g，42mmol，2.0當(dāng)量)和K2CO3(11.59g，84mmol，4.0當(dāng)量)在DMF(100mL)中的溶液在80℃下攪拌4h。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫并且過濾。將濾液在減壓下濃縮。將混合物用水(50mL)稀釋，用乙酸乙酯(2x50mL)萃取。將合并的有機(jī)層用鹽水(3x50mL)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，在減壓下濃縮。將殘余物通過硅膠柱色譜法(用PE:EA＝10:1洗脫)純化以給出標(biāo)題化合物(3.53g，58％)。LC-MS(M+H)+＝290.9。
步驟2：7-溴-1H-吡咯并[2,3-B][1,4]惡嗪-2(3H)-酮
在60℃下向在AcOH(30mL)溶液中的2-((5-溴-3-硝基吡啶-2-基)氧基)乙酸甲酯(3.53g，12.13mmol，1.0當(dāng)量)溶液中分批添加Zn粉(4.73g，72.78mmol，6.0當(dāng)量)。然后將反應(yīng)混合物在100℃下攪拌1h，將冷卻的反應(yīng)混合物過濾并且在減壓下除去溶劑。將殘余物通過硅膠柱色譜法(用DCM:MeOH＝20:1洗脫)純化以給出標(biāo)題化合物(1.6g，58％)。LC-MS(M+H)+＝229.0。
應(yīng)用[1]
7-溴-1H-吡咯并[2,3-B][1,4]惡嗪-2(3H)-酮可用于制備化合物7-(5-(3-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪，該化合物是一種HPK1抑制劑。
HPK1調(diào)節(jié)各種免疫細(xì)胞的多樣功能，并且已顯示其激酶活性在T細(xì)胞受體(TCR)[Liou J.,等人,Immunity,2000.12(4):p.399-408]、B細(xì)胞受體(BCR)[Liou J.,等人,Immunity,2000.12(4):p.399-408]、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子受體(TGF-βR)[Wang,W.,等人,J BiolChem,1997.272(36):第22771-5頁；Zhou,G.,等人,J Biol Chem,1999.274(19):第13133-8頁]、或Gs偶聯(lián)的PGE2受體(EP2和EP4)[Ikegami,R.,等人,J Immunol,2001.166(7):第4689-96頁]的激活之后被誘導(dǎo)。HPK1的過表達(dá)以激酶依賴性的方式抑制TCR誘導(dǎo)的AP-1依賴性基因轉(zhuǎn)錄的激活，表明需要HPK1來抑制Erk MAPK途徑[Liou J.,等人,Immunity,2000.12(4):第399-408頁]并且這種阻斷被認(rèn)為是負(fù)調(diào)節(jié)TCR誘導(dǎo)的IL-2基因轉(zhuǎn)錄的抑制機(jī)制[S.Sawasdikosol.,等人,Immunol Res,2012.54:262-265]。
體外HPK1-/-T細(xì)胞具有較低的TCR激活閾值，穩(wěn)健地增殖、產(chǎn)生增強(qiáng)量的Th1細(xì)胞因子，HPK1-/-小鼠經(jīng)歷更嚴(yán)重的自身免疫癥狀[S.Sawasdikosol.,等人,Immunol Res,2012.54:262-265]。在人體中，HPK1在銀屑病性關(guān)節(jié)炎患者的外周血單核細(xì)胞或系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)患者的T細(xì)胞中下調(diào)[Batliwalla F.M.,等人,Mol Med,2005.11(1-12):第21-9頁]，這表明HPK1活性的減弱可能有助于患者的自身免疫。此外，HPK1還可以經(jīng)由T細(xì)胞依賴性機(jī)制控制抗腫瘤免疫。在產(chǎn)生PGE2的Lewis肺癌腫瘤模型中，與野生型小鼠相比，腫瘤在HPK1敲除小鼠中發(fā)展得更慢[美國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)?007/0087988]。HPK1缺陷型T細(xì)胞在控制腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移方面比野生型T細(xì)胞更有效[Alzabin,S.,等人,Cancer ImmunolImmunother,2010.59(3):第419-29頁]。類似地，與野生型BMDC相比，來自HPK1敲除小鼠的BMDC更有效地產(chǎn)生T細(xì)胞應(yīng)答以根除Lewis肺癌[Alzabin,S.,等人,J Immunol,2009.182(10):第6187-94頁]。總之，HPK1可能是用于增強(qiáng)抗腫瘤免疫的良好靶標(biāo)。
參考文獻(xiàn)
[1] [中國(guó)發(fā)明] CN201980038718.0 作為HPK1抑制劑的吡咯并[2,3-B]吡啶或吡咯并[2,3-B]吡嗪及其用途