背景及概述[1]
羅漢果黃素為黃酮苷類化合物,目前發(fā)現(xiàn)該成分僅局限分布在葫蘆科植物羅漢果SiraitiagrosvenoriiSwingl(MomordicagrosvenoriiSwingle)的成熟果實(shí)中。羅漢果為中國(guó)特有經(jīng)濟(jì)、藥用植物。羅漢果黃素為羅漢果的特征性成分,具有抗氧化、抗菌、抗補(bǔ)體等活性,可作為理想的天然黃色素用于食品、飲料的著色劑,色度高,安全無(wú)毒副作用;高純度的羅漢果黃素可作為化學(xué)對(duì)照品用于羅漢果藥材、含羅漢果制劑的定性鑒別及定量分析。

羅漢果黃素在羅漢果中含量較低。因此,如何從羅漢果中制備羅漢果黃素具有重要意義。有研究一種從鮮羅漢果分離羅漢果黃素的方法,即新鮮羅漢果用水提取,水溶液經(jīng)大孔樹(shù)脂柱層析、硅膠柱層析后,重結(jié)晶得到羅漢果黃素。這種方法要求使用新鮮羅漢果,而市售商品羅漢果均為干果;同時(shí),采用該方法制備羅漢果黃素收率低于十萬(wàn)分之二,操作繁瑣,成本高,不利于大量制備羅漢果黃素。
制備[1]
一種羅漢果黃素的優(yōu)化提純制備方法,具有純度高、得率高、工藝簡(jiǎn)單、成本低等優(yōu)點(diǎn)。通過(guò)將羅漢果水煮液采用大孔樹(shù)脂吸附并經(jīng)洗脫得到羅漢果黃素浸膏,再將羅漢果黃素浸膏進(jìn)行SephadexLH20柱層析并洗脫后收集其中流份并重復(fù)層析洗脫操作至少一次,得到純度大于95%以上的羅漢果黃素精制品,具體步驟如下:
1)成熟羅漢果干果200g,粉碎成粗粉,加入1000mL水煎煮0.5h,4800轉(zhuǎn)/分鐘離心20min,得水溶液。
2)取水溶液,緩慢流過(guò)HZ801大孔樹(shù)脂(6.5cm×80cm,流速5mL/min),先用50%(v/v)酒精洗脫(流速10mL/min)至洗脫液無(wú)色,收集乙醇洗脫液,減壓回收乙醇供下次使用;繼用60%(v/v)的酒精洗脫(流速10mL/min)至洗脫液無(wú)色,收集洗脫液,減壓回收乙醇得羅漢果黃素浸膏4.2g。
3)將羅漢果黃素浸膏進(jìn)行SephadexLH20柱層析(4.0cm×100cm),60%甲醇洗脫(流速3mL/min,30mL/流份)至洗脫液無(wú)色,減壓回收甲醇供下次使用,TLC檢測(cè)(展開(kāi)劑:氯仿甲醇水60:35:5;顯色劑:10%硫酸乙醇;顯色方法:加熱顯色),合并主要含羅漢果黃素流份,減壓回收溶劑得羅漢果黃素粗品351mg。
4)羅漢果黃素粗品甲醇溶解,再次加入SephadexLH20柱(2.5cm×60cm)中,用60%(v/v)甲醇水溶液洗脫(流速1mL/min,10mL/流份)至洗脫液無(wú)色,TLC上述條件檢測(cè),合并主要含羅漢果黃素流份,減壓回收溶劑得羅漢果黃素精制品219mg,經(jīng)HPLC檢驗(yàn)其純度為97.1%。
主要參考資料
[1] CN201210526367.8羅漢果黃素的優(yōu)化提純制備方法