研究背景

凝血酶-抗凝血酶復合物(thrombin-antithrombin complex，TAT)是人體內凝血和抗凝血相互作用以維持生理平衡的產物，是凝血酶生成的標志物之一，檢測TAT對診斷和治療彌漫性血管內凝血(DIC)、深靜脈血栓(DVT)和急性心肌梗死(AMI)都有重要的意義。對監(jiān)控腫瘤、器官移植、肝病和懷孕等生理病理狀態(tài)下凝血-抗凝血的變化也很有意義^[1]。小鼠凝血酶抗凝血酶復合物(TAT)ELISA試劑盒是以凝血酶抗凝血酶復合物抗體為主要作用物的測定產品。

原理

關于該類試劑盒的作用機理，我們可以從“人凝血酶抗凝血酶復合物(TAT)ELISA試劑盒”的相關介紹做一簡單了解^[2]。具體地，應用雙抗體夾心酶標免疫分析法測定標本中TAT水平。用純化的抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入TAT抗原，生物素化的抗TAT抗體，HRP標記的親和素，經過徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的TAT呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，計算樣品濃度。

生產實例

凝血酶抗凝血酶復合物研究領域報道了多種不同的試劑盒產品，例如，生物技術領域報道了一種凝血酶抗凝血酶復合物檢測試劑盒。該試劑盒包含兩種單克隆抗體，一種單克隆抗體不與凝血酶原，凝血酶反應，但與TAT，ATIII反應；一種單克隆抗體不與ATIII，但與凝血酶原，凝血酶，TAT反應；這兩種抗體測定TAT時添加凝血酶原不影響兩個抗體對TAT的檢測，不會對凝血酶原產生交叉反應，且能夠應用到不同的試劑盒中實現高靈敏度和高精度的檢測。對于凝血酶抗凝血酶復合物的檢測具有重大意義^[3]。本篇我們所介紹的小鼠凝血酶抗凝血酶復合物(TAT)ELISA試劑盒的生產研究也可以采取上述工藝，只不過抗體來源限定小鼠。

有關研究

為了分析凝血酶-抗凝血酶復合物(TAT)，纖溶酶-α2-纖溶酶抑制劑復合物(PIC)和血栓彈力圖(TEG)評估腫瘤患者凝血功能的價值。方研究人員選取一定數量的腫瘤患者與同期體檢健康者做對照實驗。比較2組TAT，PIC，TEG各參數的差異。結果發(fā)現， 病例組TAT，PIC高于對照組(P<0.05)。血栓極高風險組TAT，PIC高于中/低風險組(P<0.05)。肝癌，肺癌，腸癌，胃癌患者TAT，PIC水平均升高，但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。TAT，PIC，TEG評價腫瘤患者血液高凝狀態(tài)的敏感性分別為85.0%，55.0%，56.70%，特異性分別為93.3%，81.7%，70.0%，ROC曲線下面積分別為0.94，0.72，0.63。也就是說，TAT，PIC可早于TEG提示腫瘤患者凝血功能異常，能更好地提示腫瘤患者血液高凝狀態(tài)^[4]。因此，能夠針對TAT做精準高效檢測的小鼠凝血酶抗凝血酶復合物(TAT)ELISA試劑盒的生產與研究具有重要意義。

參考文獻

[1]陳紅兵,鄭佐婭,王鴻利.凝血酶-抗凝血酶復合物的檢測和臨床應用[J].國外醫(yī)學(臨床生物化學與檢驗學分冊), 2001.

[2]人凝血酶抗凝血酶復合物(TAT)ELISA試劑盒[J].

[3]蔣會會,李伯宏,邊穎,等.一種凝血酶抗凝血酶復合物檢測試劑盒:CN202310238650.9[P].

[4]賴媛媛,何振業(yè),沈化清,等.凝血酶-抗凝血酶復合物,纖溶酶-α2-纖溶酶抑制劑復合物和血栓彈力圖評估腫瘤患者凝血功能的價值[J].檢驗醫(yī)學, 2024, 39(1):43-46.DOI:10.3969/j.issn.1673-8640.2024.01.008.