介紹
alpha-納富妥苯（p-Naphtholbenzein,PNB）是一種具有大共軛芳香結(jié)構(gòu)的疏水有機(jī)試劑，可通過(guò)π-π堆積作用特異性吸附芳香族生物堿。
圖一 alpha-納富妥苯
功能化顆粒的制備
采用化學(xué)共沉淀法，在氮?dú)獗Ｗo(hù)與超聲條件下，將鐵鹽混合溶液滴加至氨水中，反應(yīng)30min后磁分離、洗滌、真空干燥。通過(guò)溶膠-凝膠法，以TEOS為硅源，在乙醇-水體系中對(duì)Fe?O?進(jìn)行包覆，制備Fe?O?@SiO?。將Fe?O?@SiO?分散于甲苯中，加入TMPA回流反應(yīng)24h，引入氨基活性位點(diǎn)。以氯乙酰氯為交聯(lián)劑，與氨基化納米顆粒反應(yīng)，構(gòu)建氯代活性反應(yīng)端。在堿性DMF體系中，alpha-納富妥苯的酚羥基與氯乙?；w粒發(fā)生親核取代反應(yīng)，完成最終功能化，產(chǎn)物經(jīng)丙酮洗滌、真空干燥備用。
XRD圖譜顯示6個(gè)特征衍射峰，對(duì)應(yīng)Fe?O?反尖晶石晶型，無(wú)雜峰出現(xiàn)；580cm?1為Fe-O鍵特征峰，1080cm?1為Si-O-Si與C-O醚鍵伸縮振動(dòng)峰，證實(shí)alpha-納富妥苯通過(guò)共價(jià)鍵成功接枝于納米顆粒表面。外觀為球形單分散顆粒，具有清晰的Fe?O?內(nèi)核與SiO?/PNB有機(jī)薄層外殼，無(wú)團(tuán)聚現(xiàn)象，保證了高比表面積與吸附效率。
圖二 功能顆粒的制備示意圖
檢測(cè)應(yīng)用
取30mL小檗堿樣品溶液（pH=4），加入20mgPNB-MNPs，室溫超聲1min完成吸附；外磁場(chǎng)分離棄去上清液，加入500μL甲醇超聲解吸20s；磁分離后取上清液，經(jīng)HPLC-UV在265nm波長(zhǎng)下定量檢測(cè)。
alpha-納富妥苯-MNPs為超順磁性材料，無(wú)剩磁與矯頑力，飽和磁化強(qiáng)度約25emu/g，可在1.4T外磁場(chǎng)下10s內(nèi)完成快速分離。有機(jī)層質(zhì)量占比達(dá)29%，100~500℃為有機(jī)官能團(tuán)分解區(qū)間。pH與樣品體積對(duì)小檗堿吸附效率影響最顯著；響應(yīng)面模型方差分析表明，模型R2=0.9781，失擬項(xiàng)不顯著（p=0.457），擬合精度極高。最優(yōu)萃取條件為：pH=4、吸附劑用量20mg、樣品體積30mL、室溫超聲1min，甲醇為最優(yōu)解吸溶劑。
小檗堿萃取回收率98.2%，5次平行實(shí)驗(yàn)RSD=3.7%；線性范圍0.01~200.00μg/L，血漿與尿液檢出限（LOD）分別為0.17、0.19μg/L，定量限（LOQ）為0.57、0.63μg/L；日內(nèi)與日間精密度RSD≤5.6%，方法重復(fù)性良好；吸附劑經(jīng)14次循環(huán)使用后，回收率仍保持96.6%，再生性能優(yōu)異。將方法應(yīng)用于健康人血漿與尿液樣品檢測(cè)，基質(zhì)凈化效果顯著，色譜圖無(wú)內(nèi)源性雜質(zhì)干擾；加標(biāo)回收率為93.9%~94.7%，本方法富集倍數(shù)更高、檢測(cè)靈敏度更優(yōu)、操作耗時(shí)更短，完全滿足生物樣品中小檗堿的痕量定量需求[1]。
參考文獻(xiàn)
[1]AGHAIE A B G,HADJMOHAMMADI M R.Fe3O4@p-Naphtholbenzein as a novel nano-sorbent for highly effective removal and recovery of Berberine:Response surface methodology for optimization of ultrasound assisted dispersive magnetic solid phase extraction[J].Talanta,2016,156-157:18-28.