概述

5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸酯對甲苯胺鹽是一種化學(xué)式為C₈H₆BrClNO₄P.C₇H₉N的化合物，又名對甲苯胺藍，簡稱BCIP。其是一種常用的生化試劑，常溫下表現(xiàn)為白色至淡黃色結(jié)晶粉末，不溶于水。該物質(zhì)主要作為?堿性磷酸酶(ALP)的顯色底物?，常與硝基四氮唑藍(NBT)配合使用進行酶聯(lián)免疫檢測 。?

應(yīng)用研究

分析檢測領(lǐng)域

（1）在pH8.0的Tris- HCl緩沖溶液及32mg/L PEG20000的存在下，堿性磷酸酯酶(ALP)催化底物5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸酯對甲苯胺鹽(BCIP)水解生成不溶性的藍色BCIP二聚體微粒，該微 粒在710nm波長處產(chǎn)生一個共振散射峰。在選定條件下，隨著ALP活性增大，710nm波長處的共振散射峰強度線性增大，堿性磷酸酯酶濃度在 0.078～1.25U/L與共振散射強度增大值ΔI呈良好線性關(guān)系，其回歸方程為：ΔI=512.6C+17.8，檢出限為9.6×10^-3U/L。該 法用于合成樣品中堿性磷酸酯酶的測定，結(jié)果滿意^[1]。

（2）磁彈性傳感器用于酸性磷酸酯酶活性測定。檢測原理是以5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸酯對甲苯胺鹽(BCIP)為底物，經(jīng)酸性磷酸酯酶水解后生成蘭色二聚物沉淀，該二聚物沉淀能緊密的附著在傳感器表面，導(dǎo)致傳感器共振頻率發(fā)生變化，傳感器共振頻率變化幅度正比于酸性磷酸酯酶濃度。分析過程中可以通過記錄傳感器共振頻率變化幅度來對酸性磷酸酯酶進行定量分析，該法可用來檢測1.5~15 U/l酸性磷酸酯酶，檢測限可以達到1.5 U/l，與分光光度法相當(dāng)^[2]。

微生物培養(yǎng)與辨別技術(shù)領(lǐng)域

文獻報道了一種念珠菌顯色培養(yǎng)基的制備方法及其應(yīng)用。具體地，利用特定濃度的氯化硝基四氮唑藍，5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸酯對甲苯胺鹽，5-溴-6-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷三者組合作為念珠菌顯色培養(yǎng)基中的主要顯色組分。進一步利用念珠菌顯色培養(yǎng)基培養(yǎng)不同種類的念珠菌一段時間后，能夠根據(jù)不同種類的念珠菌顯示出不同的顏色。其中，白色念珠菌能夠顯示出明顯的紅色，與其他種類的念珠菌的顏色均不同，紅色菌落不僅顯眼，相較于淡綠色或綠色菌落也更容易識別，能夠很好地與其他菌落的顏色區(qū)分開來，便于鑒定人員直接通過肉眼觀察并辨別出白色念珠菌^[3]。

參考文獻

[1]梁愛惠,劉高傘,蔣治良.5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸鹽共振散射光譜法檢測堿性磷酸酯酶[J].廣西師范大學(xué)學(xué)報：自然科學(xué)版, 2012, 30(2):7.DOI:10.3969/j.issn.1001-6600.2012.02.018.

[2]吳仕輝.磁彈性無線生物傳感器在生化分析中的應(yīng)用研究[D].湖南大學(xué),2006.DOI:10.7666/d.y892959.

[3]陳彩霞,李仲華,譚子欣,等.一種念珠菌顯色培養(yǎng)基及其制備方法和應(yīng)用:CN202411791101.5[P].