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DL-組氨酸的合成

2026/5/2 8:00:11 作者:火華

簡介

DL-組氨酸為白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末,無臭,味微苦,在水中略溶,在乙醇中微溶,在乙醚中幾乎不溶,水溶液呈酸性或近中性,廣泛應(yīng)用于藥品制劑、保健食品及生化研究等領(lǐng)域。

 DL-組氨酸的性狀

DL-組氨酸的性狀

合成

方法一:在37°C下進行含有5mg/l蘇氨酸和50mg/l酪蛋白的M9培養(yǎng)基16小時。將培養(yǎng)基鋪在含有5mg/l蘇氨酸和50mg/l酪蛋白的M9瓊脂平板上。在室溫下孵育培養(yǎng)基,直至形成菌落。將菌落形成突變體應(yīng)用于第二次篩選。在第二次篩選中,將突變體接種到800μl含有25μg/ml氯霉素和0.1 mM異丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷的LB培養(yǎng)基中。將混合物在37°C下孵育16小時。在2800 x g的條件下收獲生長的細(xì)胞10分鐘。用100mM Tris-HCl(pH 8.5)洗滌生長的細(xì)胞兩次。將生長的細(xì)胞重新懸浮到相同的緩沖液中。將部分(50μl)細(xì)胞懸浮液與50μl 30 mM l-Trp溶液混合。將細(xì)胞懸浮液在37°C下孵育16小時,然后加入100μl由10 mM Tris-HCl(pH 8.5)、1 U/ml d-氨基酸氧化酶、100 U/ml過氧化物酶、5 mM苯酚組成的比色測定混合物。向懸浮液中加入1 mM 4-氨基安替比林。經(jīng)過培養(yǎng)分離得到標(biāo)題化合物DL-組氨酸[1]。

方法二:將石墨粉末(Aldrich制造,粉末<100目,99.99%)5mg和金屬鐵粉(Wako Pure Chemical Industries,有限公司,海綿鐵,99.9%)300mg放置在圖1的二氧化硅舟上。也可以將兩種粉末混合并直接放置在二氧化硅舟上,但如果兩種粉末都撒在放置在同一二氧化硅舟上的二氧化硅棉上,則反應(yīng)會得到更多促進。圖1系統(tǒng)中的氮氣以600 ml/分鐘的速度流動并穩(wěn)定,然后用電爐加熱。爐溫超過200°C,500~1000°C是理想的。達(dá)到相同溫度后,加熱水源和氨源,操作水龍頭(1)~(7),使載氣氮氣輸送水蒸氣和氨氣。通過與石墨反應(yīng)產(chǎn)生的氨基酸和過量水蒸氣被載氣攜帶,變成氨基酸水溶液并被困在燒瓶C中。被困的氨基酸水溶液被冷凍干燥或通過離心機(DC-800,由Yamato Scientific Co.制造)干燥,固體成分再次溶解在0.02N HCl中,并通過高效液相色譜儀純化得到標(biāo)題化合物DL-組氨酸[2]。

參考文獻(xiàn)

[1] Synthesis of DL-tryptophan by modified broad specificity amino acid racemase from Pseudomonas putida IFO 12996 By: Kino, Kuniki; et al. Applied Microbiology and Biotechnology (2007), 73(6), 1299-1305.

[2] Method for preparing amino acids from graphite as raw material Assignees: Japan Science and Technology Agency; National Institute of Materials Science Inventors: Nakazawa, Hiroki; et al. Japan.

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