介紹

叔丁氧羰基-D-叔亮氨酸中的叔丁氧羰基(tertbutyloxy-carbonyl,Boc)是氨基酸常用的N端保護(hù)基,經(jīng)其保護(hù)后的氨基酸可以直接用于多肽藥物的合成，因此制備叔丁氧羰基-叔亮氨酸(Boc-tertleucine)有利于叔亮氨酸進(jìn)一步應(yīng)用于多肽藥物合成。Boc保護(hù)氨基酸的制備有以下幾種方法:Boc-N3(Schnabel法)、Boc-Cl法、Boc-OC6H5法、叔丁氧羰基碳酸酐[(Boc)2O]法等。其中(Boc)2O法反應(yīng)條件溫和，操作簡便，試劑經(jīng)濟(jì)易得，是實(shí)驗(yàn)室制備Boc保護(hù)氨基酸的常用方法。

圖一 叔丁氧羰基-D-叔亮氨酸

合成

取叔亮氨酸對照品0.24 g(1.83 mmol),置于50mL的圓底燒瓶中,加蒸餾水15 mL溶解,用1 mol·L^-1NaOH調(diào)節(jié)溶液pH值約為9，將其置于冰浴中，控制溫度不超過10℃；稱取(Boc)2O 0.479 g(2.19mmol)，溶于一定體積的有機(jī)溶劑中；在10℃左右滴加(Boc)2O的溶劑,邊滴邊攪拌，過程中用NaOH調(diào)節(jié)pH值保持在8~9左右，完成后繼續(xù)低溫攪拌2 h，之后緩慢升至室溫；攪拌過程仍要嚴(yán)格控制pH；反應(yīng)終止后減壓蒸除有機(jī)溶劑，等體積乙醚萃取3次,棄去乙醚層;水層用稀鹽酸中和至pH3，等體積乙酸乙酯萃取3次，合并有機(jī)層；再用0.1 mol·L-1鹽酸洗滌，飽和氯化鈉溶液洗至中性，無水Na2SO4干燥，蒸干得產(chǎn)品叔丁氧羰基-D-叔亮氨酸，稱重并計算產(chǎn)物收率。采用四氫呋喃-水體系，溶劑配比為1:1(V/V),叔亮氨酸反應(yīng)濃度為25mg·mL^-1，室溫反應(yīng)約24 h,反應(yīng)收率最高，可達(dá)90.63﹪。產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱層析后純度較高，其結(jié)構(gòu)經(jīng)紅外光譜和質(zhì)譜鑒定。

對反應(yīng)產(chǎn)物叔丁氧羰基-D-叔亮氨酸進(jìn)行硅膠柱層析純化,樣品以乙酸乙酯溶解,上樣量為1.0 mL(約0.14 mol),以乙酸乙酯:石油醚為1:1的洗脫劑洗脫,減壓蒸發(fā)去除有機(jī)溶劑,置4℃冰箱低溫結(jié)晶。Boc-tert-leucine:mp 119~121℃(對照品為118~121℃);MS(m/z):232[M+H]+;IR(KBr,cm-1)ν:3373(-NH-),1748,1721(-C=O-O),1160(-C=O-O),2972(-CH3),3345(-COOH),1661(-C=O-OH),1397,1368(-(CH3)3)[1]。

圖二 叔丁氧羰基-D-叔亮氨酸的合成

參考文獻(xiàn)

[1]梁才,羅晨,周雅瓊,等.叔丁氧羰基-叔亮氨酸(Boc-tert-leucine)的合成研究[J].藥學(xué)與臨床研究,2011,19(03):282-283.DOI:10.13664/j.cnki.pcr.2011.03.002.