背景及概述

二甲苯青FF，英文名為Xylene Cyanol FF，別稱酸性藍147、二甲苯藍，是生物實驗常用的三苯甲烷類酸性陰離子染料，CAS號為2650-17-1，分子式C??H??N?NaO?S?，相對分子質(zhì)量538.61。該物質(zhì)擁有典型的三苯甲烷共軛發(fā)色體系，分子帶有磺酸根陰離子基團，顯色性能穩(wěn)定，電泳遷移速率固定，是分子生物學(xué)核酸電泳實驗中不可或缺的示蹤染料，廣泛應(yīng)用于核酸檢測、蛋白分析與組織染色領(lǐng)域。

性質(zhì)

二甲苯青FF為暗綠至藍黑色結(jié)晶粉末，極易溶于純水，水溶液呈現(xiàn)通透的深藍色，也可溶于甲醇、乙醇等極性醇類溶劑；幾乎不溶于乙醚、丙酮等弱極性有機溶劑。作為酸性陰離子染料，二甲苯青 FF水溶液呈弱酸性，可與帶正電的蛋白、核酸片段產(chǎn)生微弱靜電作用。分子內(nèi)大π共軛體系使其顯色極為穩(wěn)定，不易受光線、輕微酸堿波動影響而變色，抗干擾能力強。

圖1 二甲苯青FF性狀圖

工業(yè)合成

采用三苯甲烷染料經(jīng)典縮合工藝制備二甲苯青 FF[1]，以間甲基苯胺、苯甲醛衍生物為原料，在酸性催化條件下發(fā)生縮合反應(yīng)，構(gòu)建三苯甲烷共軛母核，再經(jīng)磺化反應(yīng)引入磺酸基團提升水溶性，最后鈉鹽化、重結(jié)晶提純得到成品。該合成工藝成熟可控，染料純度高，發(fā)色雜質(zhì)少，能夠滿足生物實驗高精度、低干擾的試劑使用標準。

用途

二甲苯青 FF是核酸電泳示蹤指示劑，常與溴酚藍復(fù)配制成上樣緩沖液。二甲苯青FF電泳遷移速度慢于溴酚藍，可標記大分子核酸片段，幫助實驗人員直觀判斷電泳進程，避免核酸跑出凝膠造成樣本損失。除此之外，它還可用于組織切片化學(xué)染色、金屬離子分光光度檢測，在生物科研、病理分析領(lǐng)域發(fā)揮關(guān)鍵作用。

參考文獻

[1]Agnes, Richard S.; Jernigan, Finith; Shell, Jennifer R.; Sharma, Vyas; Lawrence, David S.Suborganelle sensing of mitochondrial cAMP-dependent protein kinase activity.[J]Journal of the American Chemical Society, 2010, vol. 132, # 17, p. 6075 - 6080, 10.1021/ja909652q.