介紹
氨基-PEG8-羧酸是一類含8個(gè)乙二醇重復(fù)單元的異雙官能團(tuán)聚乙二醇衍生物，PEG鏈段使其具有良好的生物相容性、低免疫原性與抗非特異性吸附能力，兩端的氨基與羧基端基活性高、反應(yīng)選擇性好，可分別與羧基/活化酯、氨基發(fā)生定向偶聯(lián)；它被廣泛用作生物偶聯(lián)連接臂，用于蛋白質(zhì)、多肽、抗體的PEG化修飾以延長生物半衰期、降低體內(nèi)免疫原性，也用于藥物遞送系統(tǒng)（如脂質(zhì)體、納米藥物載體）的功能化改性、生物傳感器界面修飾與水凝膠交聯(lián)體系構(gòu)建，是生物醫(yī)藥領(lǐng)域制備靶向制劑、生物探針與功能生物材料的修飾原料。
圖一 氨基-PEG8-羧酸
合成
將相應(yīng)疊氮化合物疊氮-八聚乙二醇-羧酸（1 當(dāng)量）溶于無水乙醇中，加入 10% 鈀碳（Pd/C，0.05 當(dāng)量）。將懸浮液真空脫氣后用氫氣置換三次，隨后在室溫、氫氣氛圍（1 bar）下攪拌 16 小時(shí)。反應(yīng)混合物經(jīng)硅藻土 545（Celite 545）墊過濾，濾液減壓蒸發(fā)，得到目標(biāo)化合物氨基-PEG8-羧酸，無需進(jìn)一步純化即可直接投入下一步反應(yīng)[1]。
圖二 氨基-PEG8-羧酸的合成
將1-氨基-3,6,9,12,15,18,21,24-八氧雜二十七烷-27-酸叔丁酯（850 g，1.71 mol）與1 M鹽酸（4.2 L）加入配有溫度計(jì)、通氮管和攪拌器的反應(yīng)容器中，待化合物溶解后于50~55℃攪拌1小時(shí)，冷卻至15℃后用10 M氫氧化鈉水溶液中和體系，加入氯化鈉與二氯甲烷（4.3 L）后洗滌，水層再用二氯甲烷（4.3 L）洗滌2次，用6 M鹽酸調(diào)pH至2后減壓濃縮；加入二氯甲烷（2.6 L）與乙醇（2.2 L），攪拌后過濾，濾液減壓濃縮，重復(fù)加入二氯甲烷（2.6 L）減壓濃縮操作3次后，加入二氯甲烷（2.6 L）溶解殘留物，溶液過濾后濾液減壓濃縮，得到氨基-PEG8-羧酸為淡黃色透明液體。氨基-PEG8-羧酸的氫核磁共振譜（1H-NMR）以氘代甲醇（CD?OD）為溶劑、四甲基硅烷（TMS）為內(nèi)標(biāo)，化學(xué)位移δ (ppm)為：2.56 (2H, 三重峰, -CH?CH?-COOH)、3.17 (2H, 三重峰, H?N-CH?CH?O-)、3.6~3.9 (32H, 多重峰, -CH?CH?O-(CH?CH?O)?-CH?CH?-)；產(chǎn)率710 g（收率87%），純度99.8%（高效液相色譜-示差折光檢測器，HPLC-RI），純度檢測的HPLC測試條件如下：儀器為沃特世（Waters）公司Alliance系統(tǒng)，色譜柱為GL Sciences Inc.生產(chǎn)的Inertsil ODS-3（柱規(guī)格4.6 mm×25 cm，粒徑5 μm），檢測器為示差折光檢測器（RID），流動(dòng)相為甲醇/5 mM乙酸銨水溶液=15/85（體積比），流速1.0 mL/min，柱溫40℃，樣品濃度1 mg/mL，進(jìn)樣量50 μL[2]。
圖三 氨基-PEG8-羧酸的合成2
參考文獻(xiàn)
[1]Béquignat J ,Ty N ,Rondon A , et al.Optimization of IEDDA bioorthogonal system: Efficient process to improve trans-cyclooctene/tetrazine interaction[J].European Journal of Medicinal Chemistry,2020,203112574.DOI:10.1016/j.ejmech.2020.112574.
[2]Current Patent Assignee: NOF - US2022/153683, 2022, A1