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植物甾醇酯的含量檢測

2020/10/20 9:12:51

背景及概述[1][2]

植物甾醇具有降低血漿總膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇的效果。由于植物甾醇的水溶性和油溶性均不理想,而酯化后能明顯提高在食用油和脂肪中的溶解度,甾醇酯能夠在人體內轉化成甾醇和脂肪酸,植物甾烷醇酯在腸道中的水解率達到90%,所以其具有植物甾醇和脂肪酸兩部分的生理功能。植物甾烷醇酯主要有β-谷甾醇酯,植物甾醇酯,菜油甾醇酯三類,目前,植物甾醇酯主要應用于涂抹食品和色拉調料中。植物甾醇酯制品已經(jīng)獲得FDA“一般認為安全(GRAS)”的認可,成為功能性食品的一種發(fā)展方向。

含量檢測[1]

步驟如下:

(1)取含植物甾醇酯的待測樣品1mL,加入到約40mL溶劑乙酸乙酯中,超聲波(100W)處理5min后,用乙酸乙酯定容至50mL,植物甾醇酯完全溶解于乙酸乙酯中,得到植物甾醇酯待測液(相當于3.75mg/mL的植物甾醇酯);

(2)將200μL植物甾醇酯待測液和100μL質量濃度為0.0015%的磷硫鐵顯色劑混合搖勻后,室溫下顯色25min,得到顯色液;

(3)取200μL的顯色液至于酶標儀中進行檢測,測得待測樣品的吸光光度值;

(4)取100mg植物甾醇酯標準樣品置于燒杯中,加入80mL乙酸乙酯,超聲處理至溶解完全,轉移至100mL容量瓶中用乙酸乙酯定容,得到植物甾醇酯標準品待測液,超聲5min可完全溶解;

使用時,吸取上述植物甾醇酯標準品待測液10mL,用乙酸乙酯定容至100mL,得到植物甾醇酯使用液A,其濃度為100μg/mL。吸取上述待測液20mL,用乙酸乙酯定容至100mL,得到植物甾醇酯使用液B,其濃度為200μg/mL。

按表1分別添加植物甾醇酯使用液A或B,并振蕩。然后,在室溫下顯色25min,在492nm下用酶標儀測定其吸光度(A),以植物甾醇酯濃度為橫坐標,吸光度(A)為縱坐標,繪制標準曲線。

表1植物甾醇酯標準曲線制作的試劑添加情況

所得標準曲線如圖1所示,植物甾醇酯濃度與吸光度值的關系為:y=0.0051x+0.0667,R2=0.9974,濃度范圍為25~125μg/mL。

(5)將步驟(3)中待測樣品的吸光光度值代入步驟(4)的線性回歸方程中,得到待測樣品中植物甾醇酯的含量,結果測得甾醇酯含量為(76.4±0.7)μg/mL。

制劑[2]

植物甾醇酯微膠囊的制備方法如下:

1.水相壁材溶液的配制:

稱取阿拉伯膠溶解在溫度60℃500mL去離子水中,加入麥芽糊精溶解,在溫度60℃條件下水浴靜置30min,再加入蔗糖酯混合均勻,制成水相壁材溶液。水相壁材溶液中阿拉伯膠的質量為32.33g(其質量分數(shù)為4.31%),麥芽糊精的質量為48.53g(其質量分數(shù)為6.47%),蔗糖酯的質量為6.00g(其質量分數(shù)為0.8%);

各組分的質量分數(shù)=[各組分質量/(總固形物質量+溶劑質量)]×100%;

2、油相芯材溶液的配制:

在植物甾醇酯中加入單甘酯,混合均勻,制成油相芯材溶液。油相芯材溶液中植物甾醇酯的質量為161.70g(其質量分數(shù)為21.56%),單甘脂的質量為1.50g(其質量分數(shù)為0.2%);

3、超聲波輔助混合:

將水相壁材溶液和油相芯材溶液在溫度60℃的水浴條件下混勻,超聲波輔助攪拌5min,得混合溶液?;旌先芤褐杏拖嘈静娜芤汉退啾诓娜芤旱馁|量比為1:0.5;

4、高剪切乳化:

用高剪切乳化機將所制得的混合溶液進行乳化,剪切轉速為10000r/min,時間為5min,得乳化液;

5、高壓均質:

將乳化液用高壓均質機在壓力為35MPa條件下,均質2次;

6、噴霧干燥:

將高壓均質后的乳化液在175℃進風溫度、60℃進料溫度、5 ml/min進料泵速、350 L/h空氣流量的條件下噴霧干燥;

7、篩分:

將噴霧干燥制得的粉末過100目篩,即可得植物甾醇酯微膠囊產(chǎn)品。

合成[3]

一種植物甾醇酯的高效合成及分離方法,步驟如下:

(1)將植物甾醇、脂肪酸與催化劑混合,經(jīng)酯化反應后得到植物甾醇酯粗品;

所述的催化劑以Cu(NO3)2為活性組分,納米羥基磷灰石為載體;

(2)將步驟(1)得到的植物甾醇酯粗品過濾后,與結晶溶劑按摩爾比為1~1:10混合,經(jīng)吸附脫色,然后在-18~10℃下冷卻結晶18~30h,得到所述的植物甾醇酯;

主要參考資料

[1] [中國發(fā)明] CN201910085592.4 一種利用酶標儀準確檢測植物甾醇酯含量的方法

[2] [中國發(fā)明] CN201310332851.1 一種植物甾醇酯微膠囊的制備方法

[3] [中國發(fā)明,中國發(fā)明授權] CN201410387486.9 一種植物甾醇酯的高效合成及分離方法

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