檢驗原理

本試劑盒采用SYBR Green I染料法實時熒光定量PCR技術，針對鯉皰疹病毒2型（CyHV-3）Sph基因高度保守區(qū)域設計特異性引物。在PCR擴增過程中，SYBR Green染料與雙鏈DNA結合后釋放熒光信號，通過實時監(jiān)測熒光強度變化，實現對病毒核酸的定性和定量分析。

主要組分

PCR預混液（MagicMix 3.0）：含Taq DNA聚合酶、dNTPs、緩沖液及SYBR Green I染料（1 mL，紅蓋）；

超純水（1 mL，亮黃色蓋）；

Sph基因特異性引物混合液（100 μL，白蓋）；

陽性對照（1×10^8 拷貝/μL，50 μL，黃蓋）；

核酸釋放劑（試用裝）（1 mL，綠蓋，20次用量）；

使用說明書（1份）。

儲存與運輸

-20℃避光保存，有效期12個月；運輸需低溫條件（冰袋或干冰）。陽性對照需單獨存放，避免交叉污染。

操作步驟

樣本處理：使用核酸釋放劑提取待測樣本DNA；

反應體系配制（40μL/反應）：

PCR預混液 20 μL

引物混合液 2 μL

模板DNA 5 μL

超純水補足至40 μL；

擴增程序（以ABI 7500為例）：

預變性：95℃ 5分鐘；

循環(huán)階段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號）；

結果判讀：

陽性：Ct值≤35，且擴增曲線呈典型S型；

陰性：無擴增曲線或Ct值≥40。

注意事項

本產品僅限科研使用；

避免反復凍融試劑；

實驗需設置陽性對照和陰性對照；

操作需符合生物安全規(guī)范，防止氣溶膠污染。

公司正在出售的產品