檢驗(yàn)原理
本試劑盒采用SYBR Green I染料法實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，針對(duì)鯉皰疹病毒2型（CyHV-3）Sph基因高度保守區(qū)域設(shè)計(jì)特異性引物。在PCR擴(kuò)增過程中，SYBR Green染料與雙鏈DNA結(jié)合后釋放熒光信號(hào)，通過實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)熒光強(qiáng)度變化，實(shí)現(xiàn)對(duì)病毒核酸的定性和定量分析。
產(chǎn)品名稱 | 鯉皰疹病毒2型染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Cyprinid Herpesvirus 2 (CyHV-2) Dye-based qPCR Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類 | 熒光定量PCR |
檢測(cè)類型 | PCR檢測(cè) | 產(chǎn)品貨號(hào) | PR3965 |
主要組分
PCR預(yù)混液（MagicMix 3.0）：含Taq DNA聚合酶、dNTPs、緩沖液及SYBR Green I染料（1 mL，紅蓋）；
超純水（1 mL，亮黃色蓋）；
Sph基因特異性引物混合液（100 μL，白蓋）；
陽性對(duì)照（1×10^8 拷貝/μL，50 μL，黃蓋）；
核酸釋放劑（試用裝）（1 mL，綠蓋，20次用量）；
使用說明書（1份）。
儲(chǔ)存與運(yùn)輸
-20℃避光保存，有效期12個(gè)月；運(yùn)輸需低溫條件（冰袋或干冰）。陽性對(duì)照需單獨(dú)存放，避免交叉污染。
操作步驟
樣本處理：使用核酸釋放劑提取待測(cè)樣本DNA；
反應(yīng)體系配制（40μL/反應(yīng)）：
PCR預(yù)混液 20 μL
引物混合液 2 μL
模板DNA 5 μL
超純水補(bǔ)足至40 μL；
擴(kuò)增程序（以ABI 7500為例）：
預(yù)變性：95℃ 5分鐘；
循環(huán)階段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號(hào)）；
結(jié)果判讀：
陽性：Ct值≤35，且擴(kuò)增曲線呈典型S型；
陰性：無擴(kuò)增曲線或Ct值≥40。
注意事項(xiàng)
本產(chǎn)品僅限科研使用；
避免反復(fù)凍融試劑；
實(shí)驗(yàn)需設(shè)置陽性對(duì)照和陰性對(duì)照；
操作需符合生物安全規(guī)范，防止氣溶膠污染。
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關(guān)鍵字： 鯉皰疹病毒2型;染料法;PCR試劑盒;
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