產(chǎn)品概述
本試劑盒基于SYBR Green染料法熒光定量PCR技術(shù)，專為克雷伯菌屬（Klebsiella spp.）的快速、高靈敏度檢測而設(shè)計。適用于臨床樣本、環(huán)境監(jiān)測及科研實驗中克雷伯菌的定性和定量分析，檢測限可達數(shù)百拷貝/反應(yīng)。
規(guī)格：50次/盒（20μL反應(yīng)體系）
保存條件：-20℃避光保存，有效期1年。
適用范圍：科研用途，嚴(yán)禁用于臨床診斷或其他非科研場景。
產(chǎn)品名稱 | 克雷伯菌通用染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Klebsiella spp. Universal Dye-based qPCR Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類 | 熒光定量PCR |
檢測類型 | PCR檢測 | 產(chǎn)品貨號 | PR3970 |
試劑盒組分
| 組分名稱 | 規(guī)格/數(shù)量 |
| 2×SYBR qPCR MasterMix | 500μL |
| 克雷伯菌通用引物干粉 | 50T（需復(fù)溶） |
| 陽性對照（無傳染性DNA） | 50μL（1×10^7拷貝/μL） |
| 熒光PCR模板稀釋液 | 1mL |
| 超純水 | 1mL |
實驗流程
樣本準(zhǔn)備：提取待測樣本DNA，建議濃度≥10 ng/μL。
引物復(fù)溶：離心引物干粉后，加入110μL超純水混勻，分裝保存于-20℃。
反應(yīng)體系配制（20μL/反應(yīng)）：
2×SYBR MasterMix：10μL
正向/反向引物：各0.5μL
DNA模板：2μL
超純水補足至20μL。
PCR程序：
預(yù)變性：95℃ 5min
循環(huán)階段（40 cycles）：95℃ 10s → 60℃ 30s（采集熒光信號）
熔解曲線分析：60℃~95℃，升溫速率0.5℃/s。
數(shù)據(jù)分析
定性檢測：熔解曲線單峰且Ct值≤35判為陽性。
定量檢測：以陽性對照log濃度為橫軸、Ct值為縱軸繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算樣本拷貝數(shù)。
注意事項
操作需在獨立潔凈區(qū)域進行，避免交叉污染。
陽性對照需與樣本分區(qū)域處理，使用帶濾芯槍頭。
若用于定量，需確保標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍覆蓋10^1~10^6拷貝/μL。
試劑開封后需短暫離心，避免液體掛壁。
性能參數(shù)
特異性：針對克雷伯菌屬保守序列設(shè)計，與其他常見病原體無交叉反應(yīng)。
靈敏度：最低檢測限100拷貝/反應(yīng)（視樣本質(zhì)量可能波動）。
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關(guān)鍵字： 克雷伯菌通用;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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