背景及概述[1][2]
人參是五加科人參屬植物人參Panax ginseng C.A.Mey.的干燥根,秋季采挖,曬干或烘干,味微苦、甘;具有大補元氣,復脈固脫,補脾益肺,生津、安神之功能;用于體虛欲脫,肢冷脈微。
到目前為止人們從人參(或紅參)中分得多種人參皂苷,包括人參皂苷R0、人參皂苷Ra1、人參皂苷Ra2、人參皂苷Ra3、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rb2、人參皂苷Rb3、人參皂苷Rc、人參皂苷Rd等二醇組人參皂苷和人參皂苷Re、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rg2等三醇組人參皂苷。

因為二醇組人參皂苷和三醇組人參皂苷具有不同的生物活性,比如說二醇組人參皂苷具有中樞抑制作用、抗溶血作用;三醇組人參皂苷則具有中樞興奮作用及溶血作用。因此,把人參(或紅參)中的人參皂苷分成二醇組人參皂苷和三醇組人參皂苷的話,就有可能獲得具有不同生物活性的有效部位,也便于從中分得人參皂苷單體。
應用[3]
1:一種抗皮膚光老化的面霜
一種面霜,按照常規(guī)方法配制,特別地,添加人參皂苷Ra2、人參皂苷Ra3、人參皂苷Rs1、人參皂苷Rs2、人參皂苷Ro、人參皂苷Rc或人參皂苷Rg6作為抗光老化成分。
2:一種抗皮膚光老化的防曬霜
一種防曬霜,按照常規(guī)方法配制,特別地,添加人參皂苷Ra2、人參皂苷Ra3、人參皂苷Rs1、人參皂苷Rs2、人參皂苷Ro、人參皂苷Rc或人參皂苷Rg6作為抗光老化成分。
3:一種抗皮膚光老化的面膜
一種面膜,按照常規(guī)方法配制,特別地,添加人參皂苷Ra2、人參皂苷Ra3、人參皂苷Rs1、人參皂苷Rs2、人參皂苷Ro、人參皂苷Rc或人參皂苷Rg6作為抗光老化成分。
4:一種抗皮膚光老化的洗面奶
一種洗面奶,按照常規(guī)方法配制,特別地,添加人參皂苷Ra2、人參皂苷Ra3、人參皂苷Rs1、人參皂苷Rs2、人參皂苷Ro、人參皂苷Rc或人參皂苷Rg6作為抗光老化成分。
5:一種抗皮膚光老化的乳液
一種乳液,按照常規(guī)方法配制,特別地,添加人參皂苷Ra2、人參皂苷Ra3、人參皂苷Rs1、人參皂苷Rs2、人參皂苷Ro、人參皂苷Rc或人參皂苷Rg6作為抗光老化成分。
制備[2]
1、總提物的制備
將紅參粉碎,以料/液比1:10(g/mL)加入75%乙醇(乙醇水溶液,體積百分濃度,下同),熱回流提取3次,每次提取2h,過濾后合并濾液,濾液濃縮干燥得到紅參總提物。
2、大孔吸附樹脂富集總皂苷
以料/液比1:20(g/mL)向紅參總提物中加入5%乙醇,攪拌溶解,過濾,上樣于D101大孔吸附樹脂柱,樹脂柱徑高比為1:8,上樣液體積為1BV,上樣速度為2BV/h,上樣結(jié)束后靜置吸附0.5h,先用25%乙醇洗脫10BV,再用75%乙醇洗脫15BV,收集75%乙醇洗脫液,濃縮干燥得紅參總皂苷。
3、微孔吸附樹脂富集目標人參皂苷
以料/液比1:20(g/mL)向紅參總皂苷中加入5%甲醇,攪拌溶解,過濾,上樣于MCIGELCHP20微孔吸附樹脂柱,樹脂柱徑高比為1:10,上樣液體積為1BV,上樣速度為2BV/h,上樣結(jié)束后靜置吸附0.5h,先用30%甲醇(甲醇水溶液,體積百分濃度,下同)洗脫8BV,再依次用含有萬分之五甲酸(體積百分濃度)的60%、70%、80%甲醇溶液洗脫4BV、3BV、3BV,分別收集第4BV的60%甲醇洗脫液、第3BV的70%甲醇洗脫液、第3BV的80%甲醇洗脫液,分別濃縮干燥得目標人參皂苷A段、目標人參皂苷B段、目標人參皂苷C段。
4、高速逆流色譜分離純化
目標人參皂苷A段:以正己烷:正丁醇:乙酸乙酯:乙醇:水(含萬分之五冰乙酸,體積百分濃度)=1:2:5:1:6為溶劑體系,靜置過夜,兩相分離后超聲脫氣,上相作為固定相,下相作為流動相;固定相以20mL/min的流速泵滿主機管路后,儀器以900rpm正向旋轉(zhuǎn),柱溫箱25℃,波長225nm;下相以2mL/min泵入主機管路,平衡后取10mL用等體積上、下相溶解的濃度為20mg/mL的目標人參皂苷A段溶液進樣,進樣后進行圖譜采集,根據(jù)色譜圖(如圖1)收集人參皂苷Ra2、人參皂苷Ra3色譜峰對應的流出液,分別濃縮干燥得人參皂苷Ra2、人參皂苷Ra3。
主要參考資料
[1] 王洪平, 楊鑫寶, 楊秀偉, 劉建勛, 王英平, & 張連學. (2013). 吉林人參根和根莖的化學成分研究. 中國中藥雜志, 38(17), 2807-2817.
[2] 周琪樂, 徐嵬, 楊秀偉, ZHOUQi-le, XUWei, & YANGXiu-wei. (2016). 中國紅參化學成分研究. 中國中藥雜志, 41(2), 233-249.
[3] 基于人參全基因組的多組學數(shù)據(jù)解析人參皂苷生物合成. Diss. 湖北中醫(yī)藥大學, 2018.