背景技術(shù)
原阿片堿(Protopine)具有膽堿酯酶抑制作用，并具有非選擇性離子通道阻滯作用，可用于治療早老性癡呆病，是早老性癡呆的一種潛在侯選藥。若從天然產(chǎn)物中提取該化合物，則不失為一種簡單、經(jīng)濟(jì)而有效的方式。原阿片堿(Protopine)化學(xué)名為：7-methyl-2，3：9，10-bis(methlenedioxy)-7，13a-secoberbin-13a-one，從夏天無中分離生物總堿的文獻(xiàn)較多，但分離原阿片堿的文獻(xiàn)較少，且所得的原阿片堿產(chǎn)率一般不超過0.1％。如專利CN1445227A(夏天無總生物堿的提取方法及其新的用途，申請?zhí)?2111103.0)：夏天無藥材在稀鹽酸中煎煮液過大孔吸附樹脂，水洗后用乙醇洗脫；乙醇洗脫液過氧化鋁凝膠柱，然后，在堿性條件下，析出生物總堿。由于夏天無中的生物堿四氫巴馬亭的鹽酸鹽，在水中溶解度很小，從而不利于原阿片堿的分離；另外，由于鹽酸的煎煮產(chǎn)生大量雜質(zhì)，結(jié)果原阿片堿不能有效地從藥材中抽提出來。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明人對原阿片堿的提取進(jìn)行了潛心研究，篩選出較佳地從夏天無中提取原阿片堿的方法，由此完成了本發(fā)明。
故本發(fā)明要解決的技術(shù)問題即是克服上述現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供了一種從夏天無中提取原阿片堿的方法。
本發(fā)明的上述技術(shù)問題是通過下列技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：
一種從夏天無中提取原阿片堿的方法，其包括以下步驟：
(1)將夏天無藥材在85～100％乙醇中熱提，濃縮提取液；
(2)回收步驟(1)中經(jīng)濃縮的提取液中的乙醇，在殘留液體中加入濃度為0.5～15％的鹽酸，放置使鹽酸不溶物充分析出；
(3)將步驟(2)中的鹽酸不溶物濾去，濾液用濃度為1～30％的強(qiáng)堿溶液中和，得生物堿沉淀a；
(4)在步驟(3)中得到的生物堿沉淀a中加入0.5～15％的鹽酸與85～100％乙醇，濾去不溶物，濾液用1～30％強(qiáng)堿溶液中和，再一次得生物堿沉淀b，洗滌并干燥得到固體物；
(5)將步驟(4)中得到的固體物進(jìn)行結(jié)晶，即得原阿片堿晶體；
其中，步驟(1)中夏天無與乙醇的比例通常為1kg藥材∶5～50L乙醇，所說的熱提一般是指回流提取，相應(yīng)的溫度為78～85℃；其提取次數(shù)可以是1～5次，每次提取時(shí)間可為1.5～5小時(shí)，多次提取時(shí)，顯然也可在上述溫度下直接加熱提取，并將各次提取液合并再濃縮。
至于步驟(2)中在殘留液體中加入鹽酸，較佳地是，至pH為0.5～2，放置10～24小時(shí)使鹽酸不溶物充分析出；其中，pH太低，如接近于0，雖鹽酸不溶物析出快，但需加鹽酸量大，且操作風(fēng)險(xiǎn)大(強(qiáng)酸環(huán)境)，而pH高于2則鹽酸不溶物析出慢且不夠充分；至于時(shí)間太短則鹽酸不溶物不能充分析出，反之，時(shí)間越長，雖然析出充分，但延長了生產(chǎn)周期。
而步驟(3)中濾液用強(qiáng)堿溶液中和，較佳地是，至pH為10～12；其中，pH太高，如接近于14，則需加強(qiáng)堿量大，且操作風(fēng)險(xiǎn)大(強(qiáng)堿環(huán)境)，而pH低于10，則沉淀不夠完全。
同理，步驟(4)中在生物堿沉淀a中加入鹽酸和乙醇，較佳地是，至pH為0.5～3，而濾液用強(qiáng)堿溶液中和，較佳地是，至pH為8～12，從而制得生物堿沉淀b。該生物堿沉淀b進(jìn)行常規(guī)洗滌以除去雜質(zhì)和過量的強(qiáng)堿溶液后，再進(jìn)行干燥得到白色固體物。
而步驟(5)中可采用氯仿、甲醇、乙醇、乙醚和丙酮等有機(jī)溶劑中的一種或幾種來進(jìn)行結(jié)晶，如可按常規(guī)方法，于60℃將白色固體溶于上述溶劑中，冷卻至室溫；還可進(jìn)一步重結(jié)晶，得無色原阿片堿晶體，熔點(diǎn)203～204℃，與對照品作混合熔點(diǎn)測定亦不下降。
較佳地是，該有機(jī)溶劑為體積比1∶1～2的氯仿和甲醇。
根據(jù)本發(fā)明，上述鹽酸濃度較佳地是3～12％；更佳地是8～10％。
而上述強(qiáng)堿溶液可以是氫氧化鈉或氫氧化鉀等溶液，其濃度較佳地是5～20％；更佳地是9～15％。
而乙醇溶液濃度較佳地是88～98％；更佳地是90～95％。
本發(fā)明從夏天無中提取原阿片堿的方法中，步驟(2)～(4)，即將生物堿溶于鹽酸或強(qiáng)堿中和時(shí)的溫度條件較佳地是0℃～50℃，通常是不需額外加熱與冷卻的室溫下，可減少原阿片堿的損失。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有明顯的優(yōu)點(diǎn)：(1)污染少：如王兆全于中草藥通訊1977年第8期第13頁所報(bào)道的提取方法，采用毒性強(qiáng)的苯作為溶劑，本發(fā)明所采用的溶劑，均能有效地回收而重復(fù)使用，因此降低污染的同時(shí)也降低成本；(2)用時(shí)短：本發(fā)明不需過柱，而且溶劑總量低，步驟少；(3)成本低：本發(fā)明所采用的設(shè)備，均為常規(guī)設(shè)備，溶劑可套用，耗能低；(4)得率高：采用本發(fā)明的方法，提取安全；從人工栽培的夏天無中提取，殘留于藥材與其他生物堿中原阿片堿的含量極低，晶體原阿片堿的得率明顯提高，占生藥量可大于0.24％(W/W)；(5)純度高：經(jīng)高效液相色譜分析，其純度也顯著提高，大多在99.5％以上；(6)耗能低：使用的溶劑總量低，涉及的水溶液，不需加熱與冷卻。
具體實(shí)施方法
制得的晶體經(jīng)高效液相色譜分析法鑒定和測定含量，具體如下：
1、TLC鑒定：經(jīng)氯仿加乙二胺；丙酮加乙二胺；石油醚，乙醚，甲醇及氨水；多種展開劑鑒定，分離得到的原阿片堿晶體與原阿片堿對照品，其Rf值相同。
2、HPLC含量測定(顧孝紅，唐平，靳祖英.反相高效液相色譜法測定夏天無中原阿片堿的含量.時(shí)珍國醫(yī)國藥，2002，13(10)：608-609)：
色譜儀：島津SHIMADZU：SPD-10A，LC-10AD，C-R8A
波長282nm；流動(dòng)相：乙腈∶甲醇∶0.2％磷酸＝150∶100∶750，二乙胺調(diào)pH＝3
色譜柱：Shim Pack-CLC-ODS
流速：1ml/分鐘
樣品濃度：3.35mg/ml
溫度：20℃
上述對照品原阿片堿：購于中國藥品生物制品檢定所。
稱取干凈的夏天無8千克，置于100L的提取釜中，加入40L 85％乙醇，加熱至80℃，2小時(shí)，將提取液經(jīng)紗布濾出，濾渣留于提取釜中，再加40L85％乙醇，繼續(xù)熱提2小時(shí)，兩次濾液合并；回收(即濃縮)其中的乙醇，得殘留液體10L。于上述殘留液體中，加入10L 5％鹽酸至pH為2，放置10小時(shí)；濾去鹽酸不溶物，濾液用15％的氫氧化鈉水溶液中和pH＝12得生物堿沉淀a；將生物堿沉淀a溶于5L 5％鹽酸，同時(shí)加入85％乙醇500ml，使溶液pH為3，濾去新產(chǎn)生的沉淀；濾液用15％的氫氧化鈉水溶液中和，pH＝12，得生物堿沉淀b，用蒸餾水洗滌該沉淀b至pH＝8，干燥得白色固體物；該固體經(jīng)氯仿與甲醇(體積比為1∶1)結(jié)晶與重結(jié)晶，得含量99.65％的無色透明原阿片堿晶體19.27g。
參考文獻(xiàn)：CN1683372A