背景[1-7]
Caspase 3(active)Rabbit Monoclonal Antibody(半胱天冬酶3兔單克隆抗體)是用Caspase 3對(duì)兔進(jìn)行系統(tǒng)免疫再取出脾臟細(xì)胞賽選出只分泌單一Caspase 3蛋白的B淋巴細(xì)胞，再將此B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行雜交。最后制得分泌單一Caspase 3蛋白和無(wú)限增值的雜交細(xì)胞。
caspase 3（CASP3）Homo sapiens該基因編碼的蛋白質(zhì)是半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶（caspase）家族的成員。半胱氨酸蛋白酶的順序激活在細(xì)胞凋亡的執(zhí)行階段起著重要作用。半胱天冬酶作為無(wú)活性酶原存在，其在保守的天冬氨酸殘基處經(jīng)歷蛋白水解加工以產(chǎn)生兩個(gè)亞基，大小不一，二聚化形成活性酶。這種蛋白質(zhì)切割并激活半胱天冬酶6,7和9，蛋白質(zhì)本身由半胱天冬酶8,9和10加工。它是淀粉樣蛋白-β4A前體蛋白切割中的主要半胱天冬酶，與神經(jīng)元死亡有關(guān)。阿爾茨海默氏病。該基因的可變剪接產(chǎn)生編碼相同蛋白質(zhì)的兩種轉(zhuǎn)錄物變體。
催化活性：在P1和P4位置嚴(yán)格要求Asp殘留。它具有優(yōu)選的Asp-Xaa-Xaa-Asp-|的切割序列，在P2處具有疏水性氨基酸殘基并且在P3處具有親水性氨基酸殘基，盡管在該位置也接受Val或Ala。：由靛紅磺酰胺抑制。，功能：參與負(fù)責(zé)凋亡執(zhí)行的半胱天冬酶的激活級(jí)聯(lián)反應(yīng)。在細(xì)胞凋亡開(kāi)始時(shí)，它在'216-Asp-|-Gly-217'鍵處蛋白水解切割聚（ADP-核糖）聚合酶（PARP）。切割并激活堿性螺旋-環(huán)-螺旋亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)域和膜附著結(jié)構(gòu)域之間的固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白（SREBPs）。裂解并激活caspase-6，-7和-9。涉及亨廷頓蛋白的裂解。，PTM：顆粒酶B，胱天蛋白酶-6的裂解，caspase-8和caspase-10產(chǎn)生兩個(gè)活性亞基。
應(yīng)用[8]
半胱天冬酶3兔單克隆抗體可用于骨癌痛大鼠的鎮(zhèn)痛效應(yīng)研究：
Caspase 3是多數(shù)細(xì)胞凋亡途徑中的末端效應(yīng)蛋白酶,但其活化需要外源刺激及上游一系列caspase分子級(jí)聯(lián)反應(yīng)。Srinivasula等通過(guò)分子生物學(xué)的方法模擬caspase3在細(xì)胞內(nèi)的活化過(guò)程,將其大、小亞基序列顛倒后,構(gòu)建了無(wú)需外源刺激或上游caspase分子作用,就可自發(fā)活化的人源性重組caspase3基因,直接介導(dǎo)靶細(xì)胞凋亡,可作為基因治療領(lǐng)域一個(gè)極好的細(xì)胞致死基因。
但人源性基因可能會(huì)誘發(fā)實(shí)驗(yàn)大鼠免疫反應(yīng),干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,因此,本研究擬通過(guò)構(gòu)建大鼠源性重組Caspase3基因,并將其與非病毒載體PEI共同定向微注射到脛骨轉(zhuǎn)移癌痛模型大鼠RVM區(qū),啟動(dòng)RVM區(qū)神經(jīng)元自發(fā)凋亡,達(dá)到“永久”性治療骨癌痛的效果。
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