二氯熒光黃，又稱二氯熒光素，為橙黃色結(jié)晶粉末，微溶于氯仿和乙醇，不溶于水和稀酸，溶于醇和稀堿溶液，且溶液帶黃綠色熒光，熔點(diǎn)為280℃(分解)。在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中，二氯熒光黃可作為熒光染料用于細(xì)胞核示蹤、蛋白質(zhì)標(biāo)記等；在分析化學(xué)中，可作為吸附指示劑，指示硝酸銀滴定氯離子時(shí)的滴定終點(diǎn)，也可用于檢測(cè)酸堿度變化；還可用于殺蟲劑、防腐劑、熒光墨水等方面。
制備方法
將熒光素(100克，0.331摩爾)和PCl5(128.5克,0.62摩爾)在650毫升氯苯中的混合物在配有回流冷凝器的1升圓底燒瓶中攪拌和加熱至140攝氏度。在6小時(shí)加熱之后,將回流冷凝器替換為蒸餾裝置，并蒸餾掉在反應(yīng)過程中形成的POCl3以及氯苯。在去除所有的POCl3和氯苯之后,加入300克N-甲基吡咯烷酮并將所得混合物在攪拌下加熱至100攝氏度，直至所有的粗二氯熒光黃溶解。溶液隨后被倒入包含1升去離子水的4升燒杯中。褐色固體沉淀出并被收集在過濾器上和在真空爐中干燥。最終褐色固體符合市售二氯熒光黃的IR、NMR和TLC[1]。
應(yīng)用
1、于文萃等人首次采用分光光度法研究了模擬生理?xiàng)l件(pH7.4 Tris-HCl緩沖溶液,離子強(qiáng)度I=0.1)下二氯熒光黃與牛血清白蛋白(BSA)相互作用的情況。研究結(jié)果表明:兩者相互作用形成穩(wěn)定的復(fù)合物,最大吸收波長(zhǎng)為509nm,與二氯熒光黃的最大吸收波長(zhǎng)502nm比較,紅移了7nm;兩者之間主要通過靜電引力結(jié)合,但并不排除疏水作用力和氫鍵;兩者之間的結(jié)合數(shù)為32[2]。
2、曲楓等人為臨床用人工腎透析液中氯化物總含量建立專屬性測(cè)定方法。方法采用二氯熒光黃吸附指示劑法測(cè)定人工腎透析液中氯化物總含量，結(jié)果氯化物的平均加樣回收率為98.1%,RSD為1.9%(n=6)。結(jié)論本法簡(jiǎn)便、快速、重復(fù)性好,為人工腎透析液的質(zhì)量控制和評(píng)價(jià)提供了可靠的依據(jù)[3]。
參考文獻(xiàn)
[1] 施樂公司. 著色劑化合物:CN200410062051.3[P]. 2005-02-09.
[2] 羅英,何冀川,萬懷龍. 2,7-二氯熒光素與蛋白質(zhì)相互作用的分光光度法研究[J]. 光譜實(shí)驗(yàn)室,2006,23(5):1099-1102. DOI:10.3969/j.issn.1004-8138.2006.05.055.
[3] 曲楓,王曉書,張紅旭. 二氯熒光黃指示終點(diǎn)測(cè)定人工腎透析液中氯化物總含量[J]. 江蘇藥學(xué)與臨床研究,2004,12(2):61-62. DOI:10.3969/j.issn.1673-7806.2004.02.028.