二氯熒光黃（2',7'-二氯熒光素，CAS：76-54-0）是呫噸類弱酸型熒光吸附指示劑，堿溶液呈現(xiàn)特征黃綠色熒光，適用pH 4~10體系。其核心用途為法揚(yáng)司法銀量滴定氯離子，計(jì)量點(diǎn)后AgCl沉淀吸附指示劑陰離子，沉淀由黃綠突變?yōu)榉奂t色，終點(diǎn)辨識(shí)度高；同時(shí)可作為pH熒光指示劑、薄層色譜顯色劑。衍生物DCFH廣泛用作生物體系活性氧熒光探針，用于氧化應(yīng)激檢測(cè)。該物質(zhì)由苯酐與二氯間苯二酚縮合制備，需避光密封儲(chǔ)存，具有一定黏膜刺激性。

應(yīng)用信息

2,7-二氯二氫衍生物的合成:以二氯熒光黃為原料，無水N,N-二甲基甲酰胺(DMF)為反應(yīng)溶劑，1-羥基苯并三氮唑（HOBt）為縮合劑進(jìn)行縮合反應(yīng)得到。反應(yīng)完成后，經(jīng)過萃取，減壓濃縮后得到粗產(chǎn)物，然后利用硅膠柱層析進(jìn)行分離純化得到中間體。中間體經(jīng)硼氫化鈉(NaBH4)還原得到粗產(chǎn)物，反應(yīng)完成后經(jīng)過萃取濃縮，硅膠柱層析，得到純化后的終產(chǎn)物。通過酰胺縮合、還原反應(yīng)得到10個(gè)2,7-二氯二氫熒光素衍生物（DCFH-1～10)，經(jīng)核磁共振、高分辨質(zhì)譜表征，衍生物結(jié)構(gòu)正確[1]。

龔波林等人在pH為3.8～7.0范圍內(nèi),利用Br₂(0.5mol/L H2SO4介質(zhì)中,Br^-與BrO₃^-反應(yīng)生成)與二氯熒光黃反應(yīng),使二氯熒光黃熒光猝。當(dāng)加入水楊酸時(shí),水楊酸的溴代反應(yīng)使體系熒光增強(qiáng),建立了熒光法間接測(cè)定痕量水楊酸的新方法。該體系激發(fā)波長(zhǎng),發(fā)射波長(zhǎng)分別為λex505nm, λ em520nm。水楊酸濃度在2.0～48.0μg/L 范圍內(nèi)呈線性關(guān)系;檢出限為2.0μg/L 。本法選擇性好,用于腳癬藥水中水楊酸的測(cè)定,結(jié)果滿意[2]。

李學(xué)強(qiáng)等人以二氯熒光黃為指示劑,熒光法間接測(cè)定微量As³⁺的新方法。在pH=5.5～7.5中性緩沖介質(zhì)中,I₂與二氯熒光黃反應(yīng),使二氯熒光黃的熒光猝滅,當(dāng)加入As³⁺與I₂反應(yīng)使體系熒光增強(qiáng),體系激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)分別為λex＝508nm,λem＝524nm。As³⁺含量在1.0～80μg·L^-1范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系,檢測(cè)限為1.0μg·L^-1。該方法靈敏度高,選擇性好,用于工業(yè)廢水和河水樣品微量As³⁺的測(cè)定,結(jié)果滿意[3]。

參考文獻(xiàn)

[1] 朱家焱. 基于2，7--二氯二氫熒光素的辣根過氧化物酶熒光底物的制備及應(yīng)用[D]. 廣州:廣州中醫(yī)藥大學(xué),2023. DOI:10.7666/Y4178130.

[2] 龔波林. 以溴化鉀-溴酸鉀-2′,7′-二氯熒光素為試劑對(duì)痕量水楊酸的間接熒光測(cè)定法[J]. 分析化學(xué),2001,29(9):1055-1057. DOI:10.3321/j.issn:0253-3820.2001.09.019.

[3] 李學(xué)強(qiáng),龔波林. 2',7'-二氯熒光素?zé)晒夥y(cè)定環(huán)境樣品中微量As(Ⅲ)的研究[J]. 光譜學(xué)與光譜分析,2000,20(3):420-422. DOI:10.3321/j.issn:1000-0593.2000.03.054.