簡(jiǎn)介

蔗果三糖（1-kestose）是低聚果糖系列中最簡(jiǎn)單的成員，由一分子葡萄糖與兩分子果糖通過(guò)β-2,1鍵連接而成，為白色無(wú)定形粉末，極易溶于水，微溶于乙醇，不溶于丙酮；甜度約為蔗糖的30 %，兼具益生元與膳食纖維雙重功能。研究人員針對(duì)我國(guó)蔗果三糖國(guó)家實(shí)物標(biāo)準(zhǔn)缺乏的現(xiàn)狀，研制蔗果三糖標(biāo)準(zhǔn)樣品，建立了蔗果三糖標(biāo)準(zhǔn)樣品的分離、純化方法，根據(jù) GB/T 15000.3-2008《標(biāo)準(zhǔn)樣品工作導(dǎo)則（3）標(biāo)準(zhǔn)樣品定值的一般原則和統(tǒng)計(jì)方法》的要求，對(duì)制備得到的蔗果三糖標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行了均勻性、穩(wěn)定性和定值研究。通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)處理，蔗果三糖標(biāo)準(zhǔn)樣品的定值結(jié)果為：標(biāo)準(zhǔn)值99.87%，置信度為95%的不確定度值0.36%。該標(biāo)準(zhǔn)樣品符合國(guó)家一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)樣品的技術(shù)要求，填補(bǔ)了國(guó)內(nèi)該領(lǐng)域的研究空白。該標(biāo)準(zhǔn)樣品的研制為低聚果糖相關(guān)產(chǎn)品的分析檢測(cè)、質(zhì)量控制等工作提供了物質(zhì)基礎(chǔ)，保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性、可比性和溯源性。同時(shí)，為低聚果糖類國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)樣品的研制提供了研制范例[1]。

蔗果三糖的性狀

合成

將相應(yīng)的酸直接懸浮在MeOH（c = 0.1 M）中。將NaOMe （5 M/L in MeOH, 0.26 mL, 1.32 mmol, 1.0 equiv）在25°C下加入混合物中。攪拌反應(yīng)30分鐘。用Amberlite IR 120 （H+）樹(shù)脂中和原油，然后過(guò)濾。在真空中濃縮濾液。用閃柱色譜法純化殘?jiān)╟h2cl2 /MeOH = 6:1 ~ 4:1, v/v）得到產(chǎn)物蔗果三糖[2]。

純化方法

取低聚果糖總樣2.0 g，溶解于5 mL純凈水中，采用P-2凝膠色譜進(jìn)行富集，流動(dòng)相為純凈水，流速為0.3 mL/min，每4 mL接一管，根據(jù)液相分析結(jié)果，收集蔗果三糖粗樣，冷凍干燥得到蔗果三糖粗品；將收集的蔗果三糖粗品溶解于70 %乙腈中，經(jīng)制備高效液相色譜分離純化，流動(dòng)相為乙腈-水（70 : 30，體積比），流速為10 mL/min，根據(jù)色譜峰收集蔗果三糖餾分，減壓濃縮去除有機(jī)溶劑，剩余溶液冷凍干燥后得到蔗果三糖單體[1]。

含量測(cè)定

薄層色譜檢測(cè)結(jié)果顯示，展開(kāi)劑為氯仿-甲醇-乙酸（1 : 1 : 0.05，體積比）時(shí)，Rf值為0.64；展開(kāi)劑為正丁醇-異丙醇-甲醇（3: 12 : 4，體積比）時(shí)，Rf值為0.62，符合薄層檢測(cè)的要求，顯色后結(jié)果顯示樣品純凈，未見(jiàn)雜質(zhì)。采用HPLC-ELSD對(duì)蔗果三糖樣品進(jìn)行分析，扣除溶劑峰，對(duì)色譜峰進(jìn)行面積歸一化定量，所得蔗果三糖的純度分析結(jié)果為99.88 %[1]。

參考文獻(xiàn)

[1] 段文娟,魏遠(yuǎn)安,陳子健,等. 蔗果三糖標(biāo)準(zhǔn)樣品的研制 [J]. 食品研究與開(kāi)發(fā), 2017, 38 (02): 180-185.

[2] Iterative Synthesis of Inulin-Type Fructooligosaccharides Enabled by Stereoselective β-D-Fructofuranosylation By: Zou, Liang-Jing; et al. Journal of Organic Chemistry (2022), 87(22), 15273-15288.