人鐵蛋白(FE)ELISA KIT是一種用于定量檢測人體樣本中鐵蛋白濃度的科研工具。鐵蛋白是由德國科學(xué)家Schmiedeber于1884年發(fā)現(xiàn)的一種能夠儲(chǔ)存鐵的蛋白質(zhì)。1937年，法國科學(xué)家Laufberger從馬脾臟成功分離出鐵蛋白，并對其進(jìn)行進(jìn)一步研究?？茖W(xué)家們發(fā)現(xiàn)除了動(dòng)物組織，鐵蛋白還存在于各種細(xì)胞和體液中，為由24個(gè)蛋白亞基自組裝成外徑為12 nm、內(nèi)徑為8 nm高度有序的籠狀結(jié)構(gòu)^[1]。鐵蛋白普遍存在于各種生物體內(nèi)，負(fù)責(zé)儲(chǔ)存過量鐵以維持體內(nèi)鐵平衡。由于鐵蛋白具有固有靶向性、天然空腔結(jié)構(gòu)、可逆性自組裝、高生物相容性及易被修飾等天然優(yōu)勢，被認(rèn)為是一種理想的遞送系統(tǒng)，廣泛應(yīng)用于多個(gè)領(lǐng)域。因此檢測其水平對于評估鐵代謝狀態(tài)、篩查缺鐵性貧血或診斷鐵過載疾病具有重要價(jià)值^[1]。

檢測原理

人鐵蛋白(FE)ELISA KIT采用雙抗體夾心法進(jìn)行定量檢測。操作步驟如下：將抗人鐵蛋白的捕獲抗體預(yù)先包被在微孔板上；隨后加入待測樣品或標(biāo)準(zhǔn)品，樣本中的鐵蛋白與孔底的捕獲抗體特異性結(jié)合，形成“抗體-抗原”復(fù)合物；然后洗去未結(jié)合的成分后，加入偶聯(lián)有標(biāo)記物（如生物素或HRP）的檢測抗體，它也會(huì)與鐵蛋白結(jié)合，從而形成“捕獲抗體-鐵蛋白-檢測抗體”的夾心結(jié)構(gòu)；再加入鏈霉親和素-辣根過氧化物酶（SAV-HRP）等試劑與檢測抗體上的標(biāo)記物結(jié)合，以放大信號(hào)；隨后加入TMB顯色底物，HRP催化TMB產(chǎn)生顏色反應(yīng)，顏色深淺與樣本中鐵蛋白含量成正比；最后加入終止液終止反應(yīng)，使用酶標(biāo)儀在450nm波長處讀取吸光度值（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，即可計(jì)算出樣本中鐵蛋白的濃度。

注意事項(xiàng)

未開封的人鐵蛋白(FE)ELISA KIT應(yīng)儲(chǔ)存在2-8°C。部分試劑盒的某些組分（如標(biāo)準(zhǔn)品）在溶解后可能需要-20°C冷凍保存，試劑盒均明確標(biāo)示為 “For Research Use Only” ，僅用于科研實(shí)驗(yàn)，不用于臨床診斷。

參考文獻(xiàn)

[1] 成金妹, 李嘉昕, 段曉品. 基于鐵蛋白的遞送系統(tǒng)在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的研究進(jìn)展[J]. 中國藥科大學(xué)學(xué)報(bào), 2024, 55(4): 530-537.