背景及概述^[1]

栓翅芹內(nèi)酯為白芷的化學(xué)成分之一。白芷始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，性溫味辛，具有散風(fēng)除濕、通竅止痛、消腫排膿的作用，臨床上廣泛用于治療感冒頭痛、眉棱骨痛、鼻塞、鼻淵、牙痛、白帶和瘡瘍腫痛等癥。此外，白芷還是各種保健品、化妝品、香料及調(diào)味品生產(chǎn)中必不可少的原料。白芷的化學(xué)成分復(fù)雜，主要含有香豆素和揮發(fā)油。藥理研究表明，香豆素為白芷的主要活性成分，其中含量較高的有歐前胡素、異歐前胡素和氧化前胡素，這三種物質(zhì)也是白芷及其相關(guān)制劑質(zhì)量控制的主要指標(biāo)。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，分離純化白芷香豆素的方法主要有反復(fù)硅膠柱層析法及高速逆流色譜法，硅膠柱層析法的操作過程繁瑣，回收率較低，經(jīng)常使用氯仿、苯等毒性較強(qiáng)的有機(jī)溶劑；在高速逆流色譜法中溶劑系統(tǒng)的選擇比較困難，缺乏理論指導(dǎo)。因此，建立一種高效快速的提取、分離純化白芷香豆素的方法對(duì)于深化白芷的藥理作用研究及完善質(zhì)量控制體系均具有重要的意義。

制備^[1]

栓翅芹內(nèi)酯主要從白芷中提取、分離純化，其步驟為：

（1）白芷香豆素的提?。簩总扑幉姆鬯椋?0倍量石油醚加熱提取3次，每次2h，過濾，將提取液合并，減壓濃縮得粗提物。

（2）白芷香豆素的分離分析：用分析型高效液相色譜儀對(duì)粗提物的組成進(jìn)行分離分析，色譜柱為C18柱（250mm×4.6mmI.D.，5μm），流動(dòng)相為甲醇-水（67：33，V/V）；流速為1.0mL/min，檢測(cè)波長為220nm，柱溫為室溫。

（3）白芷香豆素的分離純化：用半制備型高效液相色譜儀對(duì)粗提物中的成分進(jìn)行分離純化，色譜柱為C18柱（250mm×25.4mmI.D.，10μm），流動(dòng)相為甲醇-水（65：35，V/V），檢測(cè)波長為220nm，柱溫為室溫。根據(jù)色譜圖手動(dòng)收集目標(biāo)組分餾分，減壓濃縮除去溶劑。

（4）化合物的純度檢測(cè)及結(jié)構(gòu)鑒定：將每一個(gè)目標(biāo)組分餾分減壓濃縮后用甲醇溶解，其純度用高效液相色譜法進(jìn)行檢測(cè)，色譜條件見步驟（2），分析結(jié)果表明3種化合物的純度都達(dá)到了98%以上。經(jīng)核磁共振波譜分析3種化合物分別是歐前胡素、栓翅芹內(nèi)酯和異歐前胡素。

主要參考資料

[1] CN201510566807.6一種從白芷中提取、分離純化3種香豆素的方法