簡介

N-乙酰-L-蛋氨酸是一種白色至類白色粉末，分子式為C7H11NO3S，分子量約為191.24。它是一種氨基酸衍生物，具有特殊的化學(xué)結(jié)構(gòu)。這種物質(zhì)在水中具有良好的溶解性，但溶解度會隨溫度變化而變化。此外，它在有機溶劑中的溶解性較差，幾乎不溶于乙醚和氯仿等非極性溶劑。

N-乙酰-L-蛋氨酸的性狀

合成方法

方法一：將fmoc保護的氨基酸（1.5等量）、1-羥基苯三唑水合物（1.5等量）、鄰苯三唑-1-基-N，N，N，N-四甲基脲銨六氟磷酸（1.5等量）和二異丙基乙胺（6等量）溶解在干燥的DMF中。將溶液與樹脂結(jié)合肽混合。在肽合成器（CEM）中，70°C微波照射5分鐘。重復(fù)這個過程兩次。用DMF，NMP和DCM清洗樹脂。用20%哌啶在NMP中處理肽基樹脂2次，微波輻照5分鐘。使用NMP清洗產(chǎn)品4次。通過在DMF中加入HBTU/HATU/HCTU/TATU//TSTU/TOTU/TNTU/TApipU（1.2equiv）和DIPEA（1.5equiv）活化α-取代丙二酸（1equiv）。在0°C下攪拌10分鐘。加入含有DMF中溶脹前樹脂結(jié)合肽的血管中。讓反應(yīng)持續(xù)10-30分鐘。通過茚三酮和/或氯胺試驗監(jiān)測反應(yīng)的完成情況。用DMF，DCM，乙醇和乙醚徹底清洗樹脂。將三氟乙酸（TFA）、水和三異丙基硅烷（TIS）（92:4.5:3.5）的混合物（10ml）冷卻至0°C。與200mg樹脂結(jié)合肽孵育。將反應(yīng)混合物搖晃2小時。用冰冷的乙醚沉淀裂解后的肽，然后離心。用乙醚洗滌肽兩次。用最小體積的ACN/TDW（1:1或3:2）溶解粗肽。純化前用高效液相色譜法將溶液凍干，得到產(chǎn)物N-乙酰-L-蛋氨酸[1]。

方法二：采用高效液相色譜法測定n-乙?；鵧、L-Met-NH2活性，色譜柱為ODS-Hypersil(5μm)4.6mm]250mm（色譜服務(wù)），流速為1ml/min。以Z-Gly-Tyr-NH2為底物。用65%（10mM硫酸四丁基氫銨）和35%乙腈等密度洗脫分離底物和產(chǎn)物，在280nm處檢測。反應(yīng)混合物的終體積為1ml，含有50mMTRIS/HCl，pH為7.5,10mMZ-Gly-Tyr-NH2和50-250μl酶制劑。在30°C下孵育混合物。加入等量的冰醋酸來停止反應(yīng)，過濾得到標(biāo)題化合物N-乙酰-L-蛋氨酸[2]。

參考文獻

[1] Mechanistic studies of malonic acid-mediated in situ acylation By: Chandra, Koushik; et al. Biopolymers (2015), 104(5), 495-505.

[2] Purification and characterization of a newly screened microbial peptide amidase. By: Stelkes-Ritter, U.; et al. Applied Microbiology and Biotechnology (1995), 44(3-4), 393-8.