研究背景
脊髓性肌萎縮癥(SMA)是一種主要發(fā)生在嬰幼兒時(shí)期的致殘致死的罕見神經(jīng)肌肉疾病，其造成肌無力和肌萎縮，目前治療仍是個(gè)難題。2021年6月，全球首個(gè)治療SMA口服藥物利司撲蘭(Risdiplam)經(jīng)國(guó)家藥監(jiān)局批準(zhǔn)上市，它是一種小分子運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元2(SMN2)前體mRNA剪接修飾劑，化學(xué)名稱為7-(4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷-7-基)-2-(2,8-二甲基咪唑并[1,2b]噠嗪-6-基)吡啶并[1,2a]嘧啶-4-酮。其可通過提高患者體內(nèi)的功能SMN蛋白水平達(dá)到治療脊髓性肌萎縮癥的作用，適用于治療2月齡及以上患者的脊髓性肌萎縮癥[1]。
作用機(jī)理
脊髓性肌萎縮癥(SMA)最常見的形式是由運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元生存(SMN)基因中的突變所引起的，并且表現(xiàn)為影響從嬰兒到成年人的廣泛嚴(yán)重性。利司撲蘭通過雙位點(diǎn)特異性調(diào)控SMN2基因(SMN1同源基因)的剪接，促進(jìn)保留外顯子Ⅶ，提高功能性SMN蛋白水平。利司撲蘭可穿透血腦屏障，分布于中樞和外周，可提高全身多系統(tǒng)SMN蛋白水平，且保持穩(wěn)定。綜合來說，利司撲蘭能夠顯著提高1型SMA患者生存率，呼吸和吞咽功能獲得改善[2]。
制備方法
方法一
首先，初始原料SM1與2?硝基?5?溴吡啶反應(yīng)生成中間體01，中間體01用三氟乙酸酐對(duì)氨基進(jìn)行保護(hù)得到中間體02，中間體02利用鈀炭催化加氫得到中間體03，然后與初始原料SM2回流關(guān)環(huán)得到中間體04，并用三氯氧磷對(duì)中間體04進(jìn)行氯化得到中間體05，中間體05在催化劑的作用下，與初始原料SM3偶聯(lián)反應(yīng)生成中間體06，最后在稀堿作用下拿到脫保護(hù)后的產(chǎn)品的粗品中間體07，然后通過精制得到合格產(chǎn)品利司撲蘭[2]。
方法二
以3-氨基-6-噠嗪為起始原料，經(jīng)過鈀催化一氧化碳參與的氧化羰基化，溴代，關(guān)環(huán)，Suzuki偶聯(lián)甲基化及Claisen酯縮合反應(yīng)得到關(guān)鍵中間體3-(2,8-二甲基咪唑并[1,2b]噠嗪-6-基)-3-氧代丙酸乙酯，將其與3-(2,8-二甲基咪唑并[1,2b]噠嗪-6-基)-3-氧代丙酸乙酯進(jìn)行縮合，BuchwaldHartwig反應(yīng)，脫保護(hù)，得到最終產(chǎn)物利司撲蘭。該方法收率高，成本低，操作簡(jiǎn)便，具有較高的應(yīng)用價(jià)值[3]。
監(jiān)測(cè)方法研究
為更好監(jiān)測(cè)脊髓性肌萎縮癥治療藥物利司撲蘭，研究人員建立了一種超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法。具體地，色譜柱為Phe‐nomenex Kinetex XB C18柱(50 mm×3 mm，2.6m)，流動(dòng)相為0.07%甲酸水溶液(pH 4.5)-0.07%甲酸乙腈溶液(pH 5.5)，梯度洗脫，流速為0.3 mL/min，柱溫為40℃，進(jìn)樣量為2L。采用電噴霧離子源(正離子模式)，多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式，利司撲蘭的離子對(duì)m/z分別為402.2→319.2，402.2→374.4，RG7800的離子對(duì)m/z為417.3→360.2。結(jié)果，利司撲蘭質(zhì)量濃度在1.95~125.00 ng/mL范圍內(nèi)與其峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積比值線性關(guān)系良好(R2=0.9991，n=8)，定量限為1.95 ng/mL。基質(zhì)效應(yīng)試驗(yàn)結(jié)果的變異系數(shù)均小于12%。精密度，穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果的RSD均小于20%，準(zhǔn)確度分別為87%~108%，87%~113%。綜合來講，該方法操作簡(jiǎn)便，高效快速，實(shí)用性強(qiáng)[4]。
聯(lián)合用藥研究
回顧性分析中南大學(xué)湘雅醫(yī)院兒童醫(yī)學(xué)中心收治的10例諾西那生鈉聯(lián)合利司撲蘭治療的SMA患兒的臨床資料，10例SMA患兒中，Ⅰ型4例，Ⅱ型4例，Ⅲ型2例，其中9例首選諾西那生鈉單藥治療，1例首選諾西那生鈉聯(lián)合利司撲蘭治療。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，10例患兒聯(lián)合治療的中位時(shí)間為10.5個(gè)月(范圍：0.5~20.0)個(gè)月，其中6例聯(lián)合治療超過6個(gè)月，運(yùn)動(dòng)和/或呼吸功能有所改善；余4例聯(lián)合治療時(shí)長(zhǎng)分別為0.5，1.0，1.3和4.0個(gè)月。整體改善不顯著。聯(lián)合治療后，5例患兒出現(xiàn)皮膚變黑，2例腰椎穿刺部位疼痛，1例嘔吐，1例痰液增多，1例全天睡眠時(shí)間減少，所有不良反應(yīng)均為輕度，無需藥物干預(yù)。也就是說，諾西那生鈉聯(lián)合利司撲蘭治療SMA有一定療效，且未見明顯不良反應(yīng)[5]。
參考文獻(xiàn)
[1]韋石鳳,孫忠實(shí),趙志剛.罕見病脊髓性肌萎縮癥治療新藥利司撲蘭的臨床藥理與應(yīng)用[J].中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志, 2022(002):038.
[2]許金溢,韓正歡,李凱,等.一種利司撲蘭的制備方法:202310874292[P].
[3]張翔,郭欣茹,張陳平,等.一種利司撲蘭的制備方法:CN202410126861.8[P].
[4]吳獻(xiàn),黃曉會(huì),林志燕,等.脊髓性肌萎縮癥患者利司撲蘭治療藥物監(jiān)測(cè)方法研究[J].中國(guó)藥業(yè), 2024, 33(12):58-61.
[5]段浩林,張慈柳,楊麗芬,等.諾西那生鈉聯(lián)合利司撲蘭治療脊髓性肌萎縮癥10例并文獻(xiàn)復(fù)習(xí)[J].中國(guó)當(dāng)代兒科雜志,
2025, 27(4):458-464.