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胰蛋白酶水解駱駝奶和牛奶乳清及其組分的抗菌活性

2021/4/25 11:45:51

從駱駝奶和奶牛乳清蛋白中分離純化抗菌肽,并對(duì)其抗菌活性進(jìn)行了研究。用胰蛋白酶水解乳清蛋白,凝膠電泳鑒定水解程度,超濾純化乳清水解物(WH),葡聚糖凝膠層析得到抗菌活性小肽。利用透射電鏡研究了抗菌肽對(duì)細(xì)菌形態(tài)的影響。測(cè)定其氨基酸組成及抗菌活性。多肽CaWHⅢ(<3kda)和CoWHⅢ(<3kda)具有最強(qiáng)的抗菌活性。Fr.A2(CaWHⅢ組分2)和Fr.B1(CoWHⅢ組分1)對(duì)大腸桿菌和葡萄球菌均有抗菌作用,F(xiàn)r.A2的最低抑菌質(zhì)量濃度分別為65mg/mL和130mg/mL,F(xiàn)r.B1的最低抑菌質(zhì)量濃度分別為130mg/mL和130mg/mL。高效抗菌肽含有大量的堿性氨基酸(28.13%的駱駝乳Fr.A2和25.07%的牛乳B1)和疏水性氨基酸。結(jié)果表明,用胰蛋白酶水解CaW和奶牛產(chǎn)生了多種有效的抗菌肽,其抗菌活性略高于牛乳乳清。

從駱駝奶和奶牛乳清蛋白中分離純化抗菌肽,并對(duì)其抗菌活性進(jìn)行了研究。用胰蛋白酶水解乳清蛋白,凝膠電泳鑒定水解程度,超濾純化乳清水解物(WH),葡聚糖凝膠層析得到抗菌活性小肽。利用透射電鏡研究了抗菌肽對(duì)細(xì)菌形態(tài)的影響。測(cè)定其氨基酸組成及抗菌活性。多肽CaWHⅢ(<3kda)和CoWHⅢ(<3kda)具有最強(qiáng)的抗菌活性。Fr.A2(CaWHⅢ組分2)和Fr.B1(CoWHⅢ組分1)對(duì)大腸桿菌和葡萄球菌均有抗菌作用,F(xiàn)r.A2的最低抑菌質(zhì)量濃度分別為65mg/mL和130mg/mL,F(xiàn)r.B1的最低抑菌質(zhì)量濃度分別為130mg/mL和130mg/mL。高效抗菌肽含有大量的堿性氨基酸(28.13%的駱駝乳Fr.A2和25.07%的牛乳B1)和疏水性氨基酸。結(jié)果表明,用胰蛋白酶水解CaW和奶牛產(chǎn)生了多種有效的抗菌肽,其抗菌活性略高于牛乳乳清。

表1不同分子質(zhì)量段乳清組分抗菌活性與抗菌活性的關(guān)系

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圖1駱駝乳清和牛乳乳清水解時(shí)間(分別為30、60、90、120、180240、300和360分鐘)對(duì)DH(水解度)的影響

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圖2使用葡聚糖凝膠從Sephadex G-25色譜柱中洗脫駱駝乳清水解肽III(CaWH III)(A)和奶牛乳清水解肽III(CoWH III)(B)的剖面圖

表2牛乳(奶牛)和駱駝乳(CaW)乳清蛋白抗菌肽提取物的最低抑菌濃度(MIC)

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表3各組分氨基酸組成分析

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