背景技術(shù)
地加瑞克，英文名：Degarelix，其肽序為：Ac-D-2-Nal-D-Phe (4-C1)-D-3-Pal-Ser-4-Aph(L-Hor) -D-4-Aph(Cbm)-Leu-Lys(iPr)-Pro-D-A1a-NH2。地加瑞克(Degarelix)是一種促性腺激素釋放激素(GnRH)受體抑制劑類藥物，可逆性抑制垂體GnRH受體來減少促性腺激素釋放繼而抑制睪酮的釋放。通過抑制對前列腺癌持續(xù)生長至關(guān)重要的睪酮來延緩前列腺癌的生長和惡化。其由Ferring(輝凌)公司研制開發(fā),經(jīng)美國食品藥品管理局(FDA) 批準(zhǔn)，于2008年12月24日在美國上市,商品名為Firmagon。
目前關(guān)于地加瑞克的合成方法種類較多,但由于地加瑞克的肽序中含有7個非天然氨基酸,且所述氨基酸均為疏水性氨基酸,所得地加瑞克粗品中副產(chǎn)物和粗肽雜質(zhì)均比較多,對分離純化的工藝要求非常高。當(dāng)前,公開的文獻(xiàn)中對地加瑞克粗品的分離純化工藝記載較少,且多以重結(jié)晶的形式進(jìn)行分離純化,對此,本發(fā)明希望提供一種新的地加瑞克提純方法。
純化方法
一、溶解：將通過固相合成得到的地加瑞克粗肽溶解于乙酸水溶液、乙腈水溶液或乙醇水溶液；
二、第一次純化：取八烷基鍵合硅膠作為色譜柱填料，流動相分為A1相和B1相，對步驟一中所得溶液進(jìn)行梯度洗脫，收集一純合格餾分，取乙酸水溶液、乙腈水溶液或乙醇水溶液對一純合格餾分稀釋一倍體積以上，得到一純稀釋餾分；其中，A1相為乙酸水溶液，所述B1相為制備級乙腈；
三、第二次純化：取十八烷基鍵合硅膠作為色譜柱填料，流動相分為A2相和B2相，對一純稀釋餾分進(jìn)行梯度洗脫，收集二純合格餾分，取乙酸水溶液、乙腈水溶液或乙醇水溶液對二純合格餾分稀釋一倍體積以上，得二純稀釋餾分；其中，所述A2相為三氟乙酸-三乙胺緩沖液，所述B2相為制備級乙腈；
四、第三次純化：取十八烷基鍵合硅膠作為色譜柱填料，流動相分為A3相和B3相，對二純稀釋餾分進(jìn)行梯度洗脫，收集三純合格餾分，取乙酸水溶液、乙腈水溶液或乙醇水溶液對三純合格餾分稀釋一倍體積以上，得三純稀釋餾分；其中，所述A3相為醋酸銨緩沖液，B3相為制備級乙腈；
五、對三純稀釋餾分進(jìn)行柱濃縮與減壓旋蒸濃縮；
六、將減壓濃縮后的肽溶液加入適量叔丁醇水溶液，經(jīng)過濾后得濾液進(jìn)行冷凍干燥得到粉末狀地加瑞克成品。
參考文獻(xiàn)
[1]浙江蘇泊爾制藥有限公司. 一種地加瑞克的純化方法:CN202110347073.8[P]. 2022-10-04.