概述^[1]

醋酸地加瑞克是一種合成的促性腺激素釋放激素（GnRH）受體拮抗劑，通過與腦下垂體的GnRH受體可逆的結(jié)合，減少促性腺激素及睪酮的釋放，從而發(fā)揮抗前列腺癌作用。以往激素療法治療前列腺癌時(shí)初期會(huì)造成睪酮濃度激增,由此可能暫時(shí)促進(jìn)腫瘤生長而不是抑制它,但醋酸地加瑞克無此現(xiàn)象。來自比利時(shí)法語區(qū)魯汶大學(xué)的Bertrand Tombal和來自德國柏林本杰明·富蘭克林醫(yī)療中心的Kurt Miller對(duì)來源于2328例不同國家的前列腺癌患者的薈萃分析研究發(fā)現(xiàn)，與接受促黃體生成素釋放激素激動(dòng)劑相比，接受醋酸地加瑞克治療的患者，總體生存率明顯上升，前列腺癌的癥狀控制得到改善，骨折概率降低，腎臟以及泌尿系統(tǒng)的不良反應(yīng)減少，還可顯著降低心血管事件的風(fēng)險(xiǎn)。

制備^[2]

（1） 取2.0g（1.0mmol）的Rink Amide MBHA (取代度=0.50mmol/g)樹脂加入到反應(yīng)柱中，加入15 mLDCM溶脹30min，去保護(hù)：加入15mL的V哌啶:VDMF =20:80混合溶液，攪拌反應(yīng)5min后抽濾除去液體，再次加入上述混合溶液，攪拌反應(yīng)10min后抽濾除去液體，如此進(jìn)行2次脫保護(hù)，然后用DMF洗滌6次，每次15mL。 

（2）偶聯(lián)Fmoc-D-Ala-OH：將0.94g (3.0mmol) Fmoc-D-Ala-OH和0.51g (3.0mmol) 6-Cl-HOBt用溶劑DMF溶解，冰浴冷卻溫度為0～10℃，加入465uL (3.0mmol) DIC，激活5分鐘后加入到反應(yīng)柱中與脫完保護(hù)的載體進(jìn)行反應(yīng)，25-35℃下反應(yīng)2小時(shí)，抽除液體，DMF洗滌3次，每次15mL。

（3）重復(fù)偶聯(lián)：重復(fù)去除Fmoc保護(hù)基及接肽反應(yīng)步驟的操作，按照地加瑞克氨基酸序列，依次偶聯(lián)：Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Ilys(Boc)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-D-4Aph(Dde)-OH、Fmoc-4Aph(Teoc)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-D-3Pal-OH、Fmoc-D-Phe(4Cl)-OH、Fmoc-D-2Nal-OH。

（4）醋酐封端：先脫去保護(hù)基Fmoc，加入15mL的V哌啶:VDMF =20:80混合溶液，攪拌反應(yīng)5min后抽濾除去液體，再次加入上述混合溶液，攪拌反應(yīng)10min后抽濾除去液體，如此進(jìn)行2次脫保護(hù)，然后用DMF洗滌6次，每次15mL。取1mL醋酐、1mL吡啶和1mLDMF，冰浴冷卻，緩慢加入載體中，25-35℃下反應(yīng)2小時(shí)，抽除液體，用DMF洗滌6次，每次15mL。

（5）去Dde保護(hù)基：加入15mL的V水合肼:VDMF =2:98混合溶液，攪拌反應(yīng)5min后抽濾除去液體，再次加入上述混合溶液，攪拌反應(yīng)10min后抽濾除去液體，如此進(jìn)行2次脫保護(hù)，然后用DMF洗滌6次，每次15mL。

（6）偶聯(lián)Cbm：加入270uL（2mmol）三甲基硅基異氰酸酯的DMF溶液，冰浴冷卻，緩慢加入載體中，低溫反應(yīng)2小時(shí)，25-35℃下反應(yīng)24小時(shí)，抽除液體，用DMF洗滌3次，每次15mL。

（7）去Teoc保護(hù)基：加入1.04g（4mmol）四丁基氟化銨的DMF混合溶液，25-35℃下反應(yīng)2小時(shí)，抽除液體，用DMF洗滌3次，每次15mL。

（8）偶聯(lián)L-Hor：將0.73g (3.0mmol) L-Hor-OH和0.51g (3.0mmol) 6-Cl-HOBt用溶劑DMF溶解，冰浴冷卻溫度為0～10℃，加入465uL (3.0mmol) DIC，激活5分鐘后加入到反應(yīng)柱中與脫完保護(hù)的載體進(jìn)行反應(yīng)，25-35℃下反應(yīng)2小時(shí)，抽除液體，DMF洗滌3次，每次15mL。

（9）裂解：將上述肽樹脂用15mL VTIS:VPhSMe:VTFA=5:5:90裂解液裂解；裂解時(shí)間：2小時(shí)；過濾，旋蒸，旋蒸母液加入90mL的乙醚中，沉降后離心洗滌5次，每次45mL。制得地加瑞克粗肽1.72g。

（10）次純化：將色譜柱用50%乙腈沖洗干凈后用5%乙腈平衡系統(tǒng)5min，以1-3g/次的上樣量進(jìn)行HPLC純化，流動(dòng)相：A為0.1%TFA水溶液; 流動(dòng)相B為乙腈；梯度程序?yàn)?初始狀態(tài)流動(dòng)相B為10%，保持5分鐘，然后在60分鐘內(nèi)將流動(dòng)相B比例增至50%;流速為：20 mL／min。于280nm波長處檢測(cè)，根據(jù)色譜峰分段收集餾分，并將收集的餾分用分析液相色譜儀進(jìn)行檢測(cè)，純度≥99.0%且單雜≤0.2%餾分即為步合格餾分。其余為不合格餾分，不合格餾分中純度大于80%部分再進(jìn)行回收純化，純度小于80%舍棄。

（11）第二次純化：將色譜柱用50%乙腈沖洗干凈后用5%乙腈平衡系統(tǒng)5min，以1-3g/次的上樣量進(jìn)行HPLC純化，流動(dòng)相：A為0.3%醋酸水溶液; 流動(dòng)相B為乙腈；梯度程序?yàn)?初始狀態(tài)流動(dòng)相B為10%，保持5分鐘，然后在60分鐘內(nèi)將流動(dòng)相B比例增至50%;流速為：20 mL／min。于280nm波長處檢測(cè)，根據(jù)色譜峰分段收集餾分，并將收集的餾分用分析液相色譜儀進(jìn)行檢測(cè)，純度≥99.8%且單雜≤0.1%餾分即為第二步合格餾分。其余為不合格餾分，不合格餾分中純度大于80%部分再進(jìn)行回收純化，純度小于80%舍棄。

（12）轉(zhuǎn)鹽、濃縮及凍干：將色譜柱用50%乙腈沖洗干凈后用5%乙腈平衡系統(tǒng)5min，以1-3g/次的上樣量進(jìn)行HPLC純化，樣品加入30%醋酸溶解，按照上述梯度要求進(jìn)行轉(zhuǎn)鹽，于280nm波長處檢測(cè)，根據(jù)色譜峰分段收集餾分，濃縮至20mg/mL左右，凍干后得到醋酸地加瑞克精肽：0.90g，純度：99.85%，收率：53.1%。

主要參考資料

[1] 姚遠(yuǎn)兵, 王玲, 夏悅, & 王卓. (2010). 治療前列腺癌的新型gnrh拮抗劑地加瑞克. 中國新藥雜志(3), 179-183.

[2] 厲保秋, 袁強(qiáng), 陳明魯, 房世紅, 董欣, & 李娜. . 一種地加瑞克的合成方法.

[3] 云曉, 吳四清, 袁劍琳, 張巍, & 陳超. . 一種固相片段法合成地加瑞克.