連接酶是一種能催化兩個不同或相同分子的兩端相連接的酶，此反應與ATP分解反應相偶聯(lián)。對于DNA損傷切除修復最后一步有連接功能的是DNA連接酶。該酶特異地催化兩條DNA單鏈片段相聯(lián)結，也就是將DNA聚合酶重新合成的DNA補片連接到切除了DNA損傷的缺口的兩端。DNA連接酶還在復制和重組等過程中出現(xiàn)斷裂時有連接作用。