L-異亮氨酸是一種必需氨基酸,它不是由身體產生的,所以必須通過食物或適當?shù)难a充劑來供應。
應用前景
L-異亮氨酸作為氨基酸原料藥中的一種,主要用于復合氨基酸輸液、三支鏈氨基酸輸液、氨基酸口服液等,用于治療肝病、肝昏迷、體弱乏力等疾病,是重要的氨基酸原料藥之一,同時也廣泛應用于食品、運動保健品及飼料添加劑等領域,市場前景十分廣闊。
提取工藝
CN105274179A目的是提供一種提取L-異亮氨酸的工藝,該方法發(fā)酵效率高,能一次性去除發(fā)酵液中雜酸及其它雜質,降低生產成本,減少廢水排放。
本發(fā)明是通過如下技術方案來實現(xiàn)的:
一種提取L-異亮氨酸的工藝,其包括以下步驟:
1)混合發(fā)酵;2)過濾;3)濃縮重溶;4)離子交換。
具體地,所述工藝包括如下步驟:
1)混合發(fā)酵:將谷氨酸棒桿菌ATCC14309種子液和乳酸發(fā)酵短桿菌ATCC13869種子液按照2∶1的體積比混合,得到混合種子液,按照5%的接種量轉入發(fā)酵培養(yǎng)基中培養(yǎng),溫度30℃,PH值7.2,培養(yǎng)時間60小時,得到L-異亮氨酸發(fā)酵液;
2)過濾:將L-異亮氨酸發(fā)酵液采用陶瓷膜過濾,收集菌體蛋白和濾液;
3)濃縮重溶:將步驟2)獲得的濾液進行蒸發(fā)濃縮,蒸發(fā)至原體積的五分之一,然后添加與濃縮液相同體積的蒸餾水重溶,制得重溶液;
4)離子交換:
①調節(jié)步驟3)所得重溶液的pH值為5,然后通入強酸離子交換樹脂柱,進行離子交換;所述強酸離子交換樹脂柱是三個離子交換樹脂柱通過管道和閥門串聯(lián)在一起,并且每一個離子交換樹脂柱底部都有一個收料閥門;
②液體從樹脂柱上部進入,下部排出;當下排液遇茚三酮顯色時,將下排液串入第二個柱,當?shù)诙€柱顯色時將第二柱的下排液串入第三個柱;
③當?shù)谌@色時再繼續(xù)外排2.5小時,排出的顯色液為谷氨酸、丙氨酸為主,此時能去除發(fā)酵液中總雜酸的40%;
④2.5小時后,停止第一柱的進料,用純水從第一柱到第三柱串洗至前流罐內再重新吸附用;
⑤當用純水沖洗結束時,用質量分數(shù)為2%的氨水,將樹脂所吸附的氨基酸解析下來,解析過程中當柱下液pH值達到6.5時,關閉收料閥門打開串柱閥門,串洗下一柱子,以此類推當?shù)谌齻€柱子柱下液pH到達6.5時繼續(xù)洗脫,不再串柱,當pH值達到8.5時,開始外排尾液3小時,停止洗脫;
⑥將離交柱內洗脫的料液濃縮,濃縮L-異亮氨酸質量濃度為10%;
⑦濃縮后的料液經(jīng)添加3‰的活性炭升溫至70℃,調節(jié)料液pH值在5.5,脫色35分鐘,然后過濾去除活性炭;
⑧脫色后的料液濃縮至原體積的1/6,然后降溫結晶,當溫度降至20℃時,離心機高速離心,得粗品,其水分含量在17%;
⑨將粗品投入脫色罐內脫色,然后濃縮、結晶、離心、干燥、粉碎得到成品。
優(yōu)選地,所述谷氨酸棒桿菌ATCC14309種子液和乳酸發(fā)酵短桿菌ATCC13869種子液的濃度均為1×108CFU/mL。
優(yōu)選地,所述發(fā)酵培養(yǎng)基組分為:葡萄糖12%、玉米漿5%、牛肉膏1%、七水硫酸鎂0.2%、磷酸氫二鉀0.2%、硫酸亞鐵0.001%、VB10.0001%,pH7.0。
參考文獻
CN105274179A